松遼地區(qū)不同品種玉米內生固氮菌多樣性比較及其促生特性研究
發(fā)布時間:2022-02-26 19:03
有益微生物對于改善環(huán)境、糧食增產(chǎn)具有重要作用,豐富的微生物資源為農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供了支持。本研究以松遼平原玉米為研究對象,采用培養(yǎng)和非培養(yǎng)方法進行了內生固氮菌多樣性研究。對玉米內生固氮菌進行了分離、鑒定,篩選出一批具有高固氮酶活性、產(chǎn)ACC脫氨酶、產(chǎn)鐵載體和溶磷能力的菌株,并對這些菌株的促生能力進行了試驗驗證。主要結果如下:(1)采用4種培養(yǎng)基從7個玉米品種(樣品編號為569、570、571、572、573、574、575)的根、莖、葉分離到762株內生固氮菌分離物。16S rDNA序列鑒定,發(fā)現(xiàn)這些菌株在分類學地位上屬于4門、7綱、10目、13科、29屬、107種。具體為Actinobacteria、Bacteroidetes、Firmicutes和Proteobacteria四個門,內生固氮菌主要為Proteobacteria,占到總分離到內生固氮菌的91.2%。Klebsiella、Enterobacter、Pseudomonas為優(yōu)勢屬,分別占到分離菌株的32%、22%和16%,合計70%。(2)以16S rDNA V5-V7區(qū)和nifH基因作為分子標記,采用Illumina...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 玉米的生產(chǎn)地位及生產(chǎn)現(xiàn)狀
1.2 生物固氮研究進展
1.2.1 生物固氮的意義
1.2.2 生物固氮類型
1.2.3 nifH基因研究進展
1.2.4 內生聯(lián)合固氮
1.3 微生物多樣性研究方法和進展
1.4 促生菌研究進展
1.5 研究目的和意義
1.6 技術路線
第二章 玉米內生固氮菌的分離與鑒定
2.1 材料與方法
2.1.1 樣品信息
2.1.2 培養(yǎng)基、試劑及引物
2.1.3 玉米內生固氮菌的分離鑒定
2.1.4 玉米內生固氮菌nifH基因檢測
2.2 結果與分析
2.2.1 分類學地位多樣性分析
2.2.2 不同玉米品種內生固氮菌多樣性比較
2.2.3 玉米植株不同部位內生固氮菌多樣性比較
2.2.4 玉米內生固氮菌nifH基因檢測結果統(tǒng)計
2.3 討論
第三章 不同品種玉米內生固氮菌多樣性分析
3.1 材料與方法
3.1.1 樣品信息
3.1.2 玉米樣品前處理
3.1.3 玉米內生細菌基因組DNA提取
3.1.4 內生細菌16SrDNAV5-V7區(qū)擴增
3.1.5 內生固氮菌nifH基因擴增
3.1.6 數(shù)據(jù)處理方法
3.2 結果與分析
3.2.1 玉米內生細菌多樣性分析
3.2.2 玉米內生固氮菌多樣性分析
3.3 討論
第四章 玉米內生固氮菌促生特性研究
4.1 材料與方法
4.1.1 供試菌株
4.1.2 培養(yǎng)基與試劑
4.1.3 菌株固氮酶活性測定
4.1.4 菌株ACC脫氨酶活性測定
4.1.5 菌株產(chǎn)鐵載體檢測
4.1.6 菌株溶磷性檢測
4.2 結果與分析
4.2.1 內生固氮菌固氮酶活性
4.2.2 內生固氮菌ACC脫氨酶活性測定
4.2.3 內生固氮菌產(chǎn)體載體檢測
4.2.4 內生固氮菌溶磷能力測定
4.3 討論
第五章 玉米內生固氮菌促進玉米苗期生長試驗
5.1 材料與方法
5.1.1 玉米品種
5.1.2 試驗菌株
5.1.3 基質及其他材料
5.1.4 促生菌株接種效果試驗
5.2 結果與分析
5.3 討論
第六章 全文總結
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]野生稻內生固氮菌多樣性研究進展[J]. 劉麗輝,蔣慧敏,王佩旋,唐小鈺,彭桂香,譚志遠. 生物技術進展. 2017(06)
[2]馬鈴薯內生固氮菌的分離及其促生特性研究[J]. 張磊,袁梅,孫建光,樊明壽,高淼,鄭紅麗. 中國土壤與肥料. 2016(06)
[3]北京優(yōu)質雜交玉米種子內生細菌種類多樣性[J]. 李南南,劉洋,趙燃,王榮煥,肖明,趙久然,程池. 食品科學技術學報. 2016(05)
[4]基于熒光定量PCR和高通量測序技術的葡萄園土壤細菌群落結構多樣性分析[J]. 王曉雯,洪振瀚,劉安瑞,羅立新. 釀酒科技. 2016(11)
[5]不同生態(tài)類型區(qū)玉米生產(chǎn)技術效率及有偏演進模式[J]. 喬丹,陸遷. 華南農(nóng)業(yè)大學學報(社會科學版). 2016(05)
[6]CAS平板覆蓋法檢測氫氧化細菌鐵載體[J]. 王衛(wèi)星,周曉倫,李忠玲,王明鵬,王衛(wèi)衛(wèi). 微生物學通報. 2014(08)
[7]促生菌接種馬尾松育苗試驗[J]. 郭飛,蔣雪剛,黃寶靈,呂成群. 廣西林業(yè)科學. 2013(01)
[8]高通量測序技術及其在農(nóng)業(yè)科學研究中的應用[J]. 閆紹鵬,楊瑞華,冷淑嬌,王秋玉,周容濤. 中國農(nóng)學通報. 2012(30)
[9]不同表面消毒方法對核桃葉內生菌分離效果的比較[J]. 李曉紅,傅本重,麻春花,劉麗. 中國農(nóng)學通報. 2012(28)
[10]豆科植物內生固氮菌的分離與篩選[J]. 管芩瀾,唐梅,張智錦,龔明福. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2012(09)
博士論文
[1]玉米和大豆根內生細菌多樣性及促生細菌鑒定評價[D]. 喻江.東北農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]長期施肥下根際碳氮轉化與微生物多樣性研究[D]. 艾超.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015
[3]蘋果、梨鐵蛋白基因的克隆及菜豆鐵蛋白基因在轉基因蘋果和番茄植株中的表達特性研究[D]. 葉霞.南京農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]玉米根際及不同部位內生固氮菌分離及其多樣性研究[D]. 呂翻洋.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
[2]湖南水稻內生固氮菌資源收集及特性研究[D]. 袁梅.中國農(nóng)業(yè)科學院 2016
[3]鐵載體高產(chǎn)菌的篩選及鐵載體的分離純化[D]. 門晉名.青島科技大學 2013
[4]玉米根際高效溶磷菌株的分離鑒定、室內溶磷條件和溶磷效果研究[D]. 朱斌.西南大學 2012
[5]ACC脫氨酶基因的檢測和有ACC脫氨酶細菌的應用[D]. 常四平.浙江大學 2012
[6]應用高通量測序分析母嬰皮膚細菌群落多樣性[D]. 曾丹寧.復旦大學 2012
[7]高通量篩選和鑒定具ACC脫氨酶的細菌[D]. 李鄭義.浙江大學 2011
[8]應用454測序技術分析菌群結構的方法學研究[D]. 華蔚穎.上海交通大學 2010
[9]甘蔗內生固氮菌的分離鑒定及16SrRNA基因克隆和序列分析[D]. 周發(fā)俊.福建師范大學 2009
[10]甘蔗內生固氮菌的分離與鑒定[D]. 蘇俊波.廣西大學 2006
本文編號:3644947
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:101 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 玉米的生產(chǎn)地位及生產(chǎn)現(xiàn)狀
1.2 生物固氮研究進展
1.2.1 生物固氮的意義
1.2.2 生物固氮類型
1.2.3 nifH基因研究進展
1.2.4 內生聯(lián)合固氮
1.3 微生物多樣性研究方法和進展
1.4 促生菌研究進展
1.5 研究目的和意義
1.6 技術路線
第二章 玉米內生固氮菌的分離與鑒定
2.1 材料與方法
2.1.1 樣品信息
2.1.2 培養(yǎng)基、試劑及引物
2.1.3 玉米內生固氮菌的分離鑒定
2.1.4 玉米內生固氮菌nifH基因檢測
2.2 結果與分析
2.2.1 分類學地位多樣性分析
2.2.2 不同玉米品種內生固氮菌多樣性比較
2.2.3 玉米植株不同部位內生固氮菌多樣性比較
2.2.4 玉米內生固氮菌nifH基因檢測結果統(tǒng)計
2.3 討論
第三章 不同品種玉米內生固氮菌多樣性分析
3.1 材料與方法
3.1.1 樣品信息
3.1.2 玉米樣品前處理
3.1.3 玉米內生細菌基因組DNA提取
3.1.4 內生細菌16SrDNAV5-V7區(qū)擴增
3.1.5 內生固氮菌nifH基因擴增
3.1.6 數(shù)據(jù)處理方法
3.2 結果與分析
3.2.1 玉米內生細菌多樣性分析
3.2.2 玉米內生固氮菌多樣性分析
3.3 討論
第四章 玉米內生固氮菌促生特性研究
4.1 材料與方法
4.1.1 供試菌株
4.1.2 培養(yǎng)基與試劑
4.1.3 菌株固氮酶活性測定
4.1.4 菌株ACC脫氨酶活性測定
4.1.5 菌株產(chǎn)鐵載體檢測
4.1.6 菌株溶磷性檢測
4.2 結果與分析
4.2.1 內生固氮菌固氮酶活性
4.2.2 內生固氮菌ACC脫氨酶活性測定
4.2.3 內生固氮菌產(chǎn)體載體檢測
4.2.4 內生固氮菌溶磷能力測定
4.3 討論
第五章 玉米內生固氮菌促進玉米苗期生長試驗
5.1 材料與方法
5.1.1 玉米品種
5.1.2 試驗菌株
5.1.3 基質及其他材料
5.1.4 促生菌株接種效果試驗
5.2 結果與分析
5.3 討論
第六章 全文總結
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]野生稻內生固氮菌多樣性研究進展[J]. 劉麗輝,蔣慧敏,王佩旋,唐小鈺,彭桂香,譚志遠. 生物技術進展. 2017(06)
[2]馬鈴薯內生固氮菌的分離及其促生特性研究[J]. 張磊,袁梅,孫建光,樊明壽,高淼,鄭紅麗. 中國土壤與肥料. 2016(06)
[3]北京優(yōu)質雜交玉米種子內生細菌種類多樣性[J]. 李南南,劉洋,趙燃,王榮煥,肖明,趙久然,程池. 食品科學技術學報. 2016(05)
[4]基于熒光定量PCR和高通量測序技術的葡萄園土壤細菌群落結構多樣性分析[J]. 王曉雯,洪振瀚,劉安瑞,羅立新. 釀酒科技. 2016(11)
[5]不同生態(tài)類型區(qū)玉米生產(chǎn)技術效率及有偏演進模式[J]. 喬丹,陸遷. 華南農(nóng)業(yè)大學學報(社會科學版). 2016(05)
[6]CAS平板覆蓋法檢測氫氧化細菌鐵載體[J]. 王衛(wèi)星,周曉倫,李忠玲,王明鵬,王衛(wèi)衛(wèi). 微生物學通報. 2014(08)
[7]促生菌接種馬尾松育苗試驗[J]. 郭飛,蔣雪剛,黃寶靈,呂成群. 廣西林業(yè)科學. 2013(01)
[8]高通量測序技術及其在農(nóng)業(yè)科學研究中的應用[J]. 閆紹鵬,楊瑞華,冷淑嬌,王秋玉,周容濤. 中國農(nóng)學通報. 2012(30)
[9]不同表面消毒方法對核桃葉內生菌分離效果的比較[J]. 李曉紅,傅本重,麻春花,劉麗. 中國農(nóng)學通報. 2012(28)
[10]豆科植物內生固氮菌的分離與篩選[J]. 管芩瀾,唐梅,張智錦,龔明福. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2012(09)
博士論文
[1]玉米和大豆根內生細菌多樣性及促生細菌鑒定評價[D]. 喻江.東北農(nóng)業(yè)大學 2016
[2]長期施肥下根際碳氮轉化與微生物多樣性研究[D]. 艾超.中國農(nóng)業(yè)科學院 2015
[3]蘋果、梨鐵蛋白基因的克隆及菜豆鐵蛋白基因在轉基因蘋果和番茄植株中的表達特性研究[D]. 葉霞.南京農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]玉米根際及不同部位內生固氮菌分離及其多樣性研究[D]. 呂翻洋.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
[2]湖南水稻內生固氮菌資源收集及特性研究[D]. 袁梅.中國農(nóng)業(yè)科學院 2016
[3]鐵載體高產(chǎn)菌的篩選及鐵載體的分離純化[D]. 門晉名.青島科技大學 2013
[4]玉米根際高效溶磷菌株的分離鑒定、室內溶磷條件和溶磷效果研究[D]. 朱斌.西南大學 2012
[5]ACC脫氨酶基因的檢測和有ACC脫氨酶細菌的應用[D]. 常四平.浙江大學 2012
[6]應用高通量測序分析母嬰皮膚細菌群落多樣性[D]. 曾丹寧.復旦大學 2012
[7]高通量篩選和鑒定具ACC脫氨酶的細菌[D]. 李鄭義.浙江大學 2011
[8]應用454測序技術分析菌群結構的方法學研究[D]. 華蔚穎.上海交通大學 2010
[9]甘蔗內生固氮菌的分離鑒定及16SrRNA基因克隆和序列分析[D]. 周發(fā)俊.福建師范大學 2009
[10]甘蔗內生固氮菌的分離與鑒定[D]. 蘇俊波.廣西大學 2006
本文編號:3644947
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