本文關鍵詞：金鐵鎖FPS基因的克隆及表達分析

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【摘要】：目的從金鐵鎖Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu中克隆三萜皂苷合成途徑中的關鍵酶法尼基焦磷酸合酶基因FPS,進行序列特征分析和不同組織中的表達情況。方法根據(jù)已獲得的金鐵鎖轉錄組數(shù)據(jù),設計FPS基因全長擴增引物,利用RT-PCR方法獲得金鐵鎖FPS基因的全長c DNA序列,并進行TA克隆、序列分析及原核表達;并設計Real-time PCR擴增引物,測定FPS在不同組織中的表達量。結果 FPS c DNA全長1135bp,開放閱讀框1029bp,編碼342個氨基酸;構建了p EASY-E1-FPS重組質(zhì)粒,獲得穩(wěn)定的原核表達體系。Real-time PCR結果表示FPS基因在根中的表達量高于葉和莖。結論成功克隆了金鐵鎖FPS基因,構建了穩(wěn)定的p EASY-E1-FPS原核表達體系,FPS基因的表達分析表明,FPS在金鐵鎖不同組織均有表達,根中表達量最高。為進一步研究金鐵鎖中三萜皂苷合成代謝途徑及其關建酶表達模式奠定基礎。
【作者單位】： 云南中醫(yī)學院;
【關鍵詞】： 金鐵鎖 法尼基焦磷酸合酶(FPS) 基因克隆 表達分析
【基金】：國家自然科學基金(No.81260609;No.81560613) 云南省自然科學基金資助項目[2014FD035,No.2015FB205(-015)]
【分類號】：S567.239
【正文快照】： 稀有瀕危物種金鐵鎖Psammosilene tunicoides W.C.Wu etC.Y.Wu為石竹科(Caryophyllaceae)單型屬植物[1],以根入藥,是“云南白藥”的主要組成藥之一,主治跌打損傷,風濕痛,癰疽瘡癤,創(chuàng)傷出血等癥[2],主要有效成分為金鐵鎖三萜總皂苷[3]。MVA途徑是植物體內(nèi)皂苷合成的主要途徑,在

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本文編號：861440