杉木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf 全文
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南京林業(yè)大學
碩士學位論文
杉木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究
姓名:席夢利
申請學位級別:碩士
專業(yè):林木遺傳育種
指導教師:施季森
20040601摘要
杉木是我國特有的常綠針葉樹種之一。因其生長快,木材質(zhì)量高,成林又迅速,而成
為重要的商品用材和造林樹種。本文以杉木幼胚、成熟合子胚、實生苗的子葉和下胚軸、
試管苗莖段等不同外植體進行器官發(fā)生和體細胞胚胎發(fā)生研究,探討了不同因素對器官發(fā)
生或體胚發(fā)生的影響。在國內(nèi)外首次誘導出了杉木體細胞胚并再生出植株,填補了國內(nèi)外
該領域的研究空白;建立了適于杉木遺傳轉(zhuǎn)化的穩(wěn)定高效的組培受體系統(tǒng):用石蠟切片方
法,觀察了不定芽和體胚的發(fā)生和發(fā)育過程;通過研究個影響杉木轉(zhuǎn)化效果的因素,初
步確定了杉木莖段較為合適的轉(zhuǎn)化體系,為杉木基因工程育種提供了關鍵的技術平臺。
以杉木成熟合子胚及幼胚為起始外植體,研究了基本培養(yǎng)基、植物激素、凝固劑種類、
有機附加物、合子胚的發(fā)育階段等因素對杉木愈傷組織的誘導、愈傷組織的繼代培養(yǎng)及不
定芽分化的影響。結果表明:,,一 幾十一 / .嘴幾蔗糖/
是成熟合子胚誘導愈傷組織的最佳培養(yǎng)基;以該配方誘導幼胚,處于胚胎選擇階段和組織
與器官分化階段的幼胚,能誘導出松軟、晶瑩透明的愈傷,誘導頻率為?%。處于組織
和器官分化及成熟階段的幼胚,誘導出愈傷的外觀形態(tài)與成熟合予胚誘導出的愈傷相似,
/一
愈傷組織的誘導頻率隨著合子胚發(fā)育的成熟而迅速提高;,,一
./
./ .幾十蔗糖/適于杉木愈傷組織繼代增殖;一
./蔗糖/是誘導不定芽發(fā)生的最佳培養(yǎng)基。
以杉木成熟合子胚及實生苗的子葉和下胚軸為起始外植體,研究了基本培養(yǎng)基、不
同種類的細胞分裂素、苗齡等因素對杉木直接器官
本文關鍵詞:杉木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號:68250
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