杉木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf
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南京林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文杉木轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究姓名:席夢利申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):林木遺傳育種指導(dǎo)教師:施季森20040601摘要杉木是我國特有的常綠針葉樹種之一。因其生長快,木材質(zhì)量高,成林又迅速,而成為重要的商品用材和造林樹種。本文以杉木幼胚、成熟合子胚、實生苗的子葉和下胚軸、試管苗莖段等不同外植體進(jìn)行器官發(fā)生和體細(xì)胞胚胎發(fā)生研究,探討了不同因素對器官發(fā)生或體胚發(fā)生的影響。在國內(nèi)外首次誘導(dǎo)出了杉木體細(xì)胞胚并再生出植株,填補(bǔ)了國內(nèi)外該領(lǐng)域的研究空白;建立了適于杉木遺傳轉(zhuǎn)化的穩(wěn)定高效的組培受體系統(tǒng):用石蠟切片方法,觀察了不定芽和體胚的發(fā)生和發(fā)育過程;通過研究7個影響杉木轉(zhuǎn)化效果的因素,初步確定了杉木莖段較為合適的轉(zhuǎn)化體系,為杉木基因工程育種提供了關(guān)鍵的技術(shù)平臺。以杉木成熟合子胚及幼胚為起始外植體,研究了基本培養(yǎng)基、植物激素、凝固劑種類、有機(jī)附加物、合子胚的發(fā)育階段等因素對杉木愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的繼代培養(yǎng)及不定芽分化的影響。結(jié)果表明:1,2MS+2,4一D 2mg幾十6一BA l-omg/L+KT 1.O嘴幾+蔗糖309/L是成熟合子胚誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基;以該配方誘導(dǎo)幼胚,處于胚胎選擇階段和組織與器官分化階段的幼胚,能誘導(dǎo)出松...
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