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能源橡膠草GGPPS基因啟動(dòng)子的克隆及瞬時(shí)表達(dá)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-08 16:37

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【摘要】:以多年生宿根型草本植物橡膠草為材料,根據(jù)已獲得的橡膠草r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)基因序列設(shè)計(jì)引物,采用TAIL-PCR擴(kuò)增到GGPPS基因5′上游大小為1131bp的序列。采用PlantCare和PLACE軟件分析,表明該序列不僅具有啟動(dòng)子的基本元件,同時(shí)還有與多個(gè)器官特異表達(dá)元件以及與脅迫相關(guān)的順式作用元件,命名為pTkGGPPS(GenBank:KT901796)。將該序列代替pCAMBIA1304質(zhì)粒上的CaMV 35S啟動(dòng)子序列,以GFP基因作為報(bào)告基因,構(gòu)建pCAMBIA1304-pTkGGPPS-GFP植物表達(dá)載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞,結(jié)果表明,該啟動(dòng)子能夠驅(qū)動(dòng)GFP基因表達(dá),具有一定的活性。TkGGPPS基因啟動(dòng)子克隆及瞬時(shí)表達(dá)為橡膠草中橡膠合成及組織特異性研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】橡膠草 GGPPS基因 TAIL-PCR 啟動(dòng)子 序列分析 瞬時(shí)表達(dá)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31360060)資助
【分類號(hào)】:S576
【正文快照】: pression啟動(dòng)子是位于結(jié)構(gòu)基因5′端上游的DNA序列,能夠活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準(zhǔn)確結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始特異性。啟動(dòng)子(promoters)就像“開關(guān)”,決定轉(zhuǎn)錄的方向和效率,控制基因表達(dá)的起始時(shí)間、空間和表達(dá)程度。目前,大多數(shù)轉(zhuǎn)基因植物所用的啟動(dòng)子是組成型啟動(dòng)子(如煙草,

本文編號(hào):640959

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