發(fā)布時間：2017-08-08 16:03

  本文關鍵詞：抗CD146抗體在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機制研究

  更多相關文章： CD146 AA98 aGVHD T細胞

【摘要】：目的:探討抗CD146抗體AA98在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)進程中的作用。方法:將純化的AA98抗體以及對照抗體AA1采用清除內毒素的柱子進行內毒素清除,檢測清除前后內毒素水平,并對成功清除內毒素的抗體測定濃度。BALB/c(H2Kd)受體小鼠接受1050cGy全身性致死性輻照,通過尾靜脈注射的方法輸注1×107 C57BL/6(H2Kb)小鼠來源的骨髓細胞和5×106全脾細胞,建立aGVHD模型。于異基因造血干細胞移植后第5天,流式檢測小鼠臟器中CD146的表達。從移植第0天(day 0)至移植后第6天(day 6)每隔一天給小鼠腹腔注射AA98抗體(200μg/只),對照組注射相同劑量的IgG抗體或AA1抗體(抗CD146對照抗體)。觀察小鼠生存和體重變化,記錄aGVHD積分。移植后第7天采用流式細胞術檢測受體小鼠的脾臟、肝臟、肺和小腸四個臟器中的免疫細胞的表型。結果:有效清除了AA1和AA98抗體中的內毒素,使內毒素水平降到了10EU/ml以內,得到可用于注射aGVHD小鼠的抗體。aGVHD小鼠臟器中CD146的表達顯著高于骨髓移植對照組。aGVHD生存實驗表明,AA98能顯著抑制異基因造血干細胞移植后aGVHD的發(fā)展,延長aGVHD小鼠的生存但不能阻止aGVHD的發(fā)生:AA98顯著延長aGVHD小鼠存活時間;顯著減輕aGVHD小鼠的體重下降;減輕小鼠aGVHD臨床癥狀,降低臨床積分。流式結果顯示AA98能減少T細胞的活化而不影響T細胞的浸潤;AA98顯著下調小鼠脾臟中CD4+T細胞和CD8+T細胞中IFN-γ和TNF-α的分泌。結論:AA98能顯著抑制aGVHD的發(fā)展但不能阻止其發(fā)生,其機制可能是通過抑制T細胞活化以及其細胞因子的分泌。
【關鍵詞】：CD146 AA98 aGVHD T細胞
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R457.7
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-14
• 參考文獻11-14
• 材料與方法14-27
• 一、實驗材料14-17
• 1、動物14
• 2、主要試劑及耗材14-16
• 3、主要儀器設備16-17
• 二、實驗方法17-27
• 1、抗體濃度測定17
• 2、內毒素清除17-18
• 3、內毒素水平檢測18-21
• 4、制備骨髓細胞和脾細胞21
• 5、異基因造血干細胞移植后aGVHD模型的建立21-22
• 6、收集小鼠脾臟、腸系膜淋巴結、肝臟、肺和小腸，制備單細胞懸液22-25
• 7、流式細胞表面染色25
• 8、流式細胞胞內染色25-26
• 9、統(tǒng)計學分析26-27
• 實驗結果27-39
• 一、AA98抗體與AA1抗體的內毒素檢測27-28
• 二、AA98抗體及AA1抗體濃度測定28
• 三、AA98抗體及AA1抗體內毒素清除28-29
• 四、BALB/c小鼠清髓性輻照劑量的確定29-30
• 五、aGVHD模型中T細胞與NK、DC細胞的CD146有高表達30-31
• 六、AA98能抑制aGVHD但不能完全阻止aGVHD的發(fā)生31-33
• 七、AA98不影響CD4+T細胞、CD8+T細胞在aGVHD靶器官的浸潤33-34
• 八、AA98抑制受體鼠肝臟中CD4+T細胞和CD8+T細胞的活化34-35
• 九、AA98不影響髓系細胞在靶器官中的浸潤35-36
• 十、AA98減少受體鼠脾臟中CD4+T細胞和CD8+T細胞IFN-γ、TNF-α 的分泌36-39
• 討論39-41
• 參考文獻41-44
• 綜述 CD146在腫瘤發(fā)展中作用的研究進展44-56
• 參考文獻49-56
• 攻讀學位期間本人出版或公開發(fā)表的論著、論文56-57
• 附錄57-60
• 致謝60-62

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔣雪梅;楊興升;張珂;申愛方;李華;;妊娠滋養(yǎng)細胞疾病患者病變組織中CD146的表達及意義[J];山東醫(yī)藥;2006年24期

2 汪年松;王鋒;范瑛;喻明;;2型糖尿病患者血漿CD146水平測定的臨床意義[J];中國實驗診斷學;2007年12期

3 王起武;查斌;王章才;;CD146及腫瘤微血管密度與前列腺癌關系的研究[J];皖南醫(yī)學院學報;2007年02期

4 王起武;王慶堂;楊航;王亮;王章才;趙友光;;CD146、血管內皮生長因子與前列腺癌血管生成關系的研究[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2011年02期

5 馬建華 ,白進良 ,傅梧 ,楊曉春;CD146與前列腺癌微血管生成關系的研究[J];中國男科學雜志;2005年04期

6 王鋒;汪年松;高許萍;范瑛;;聯(lián)合檢測CD146與P-選擇素對2型糖尿病腎病的意義[J];海南醫(yī)學;2012年11期

7 魏曉龍;羅香蓉;白靜雯;席迪迪;;CD146在乳腺癌中的表達及意義[J];汕頭大學醫(yī)學院學報;2014年02期

8 樊靜;任紅;岳秀杰;景曉春;李建柱;康文喜;張鳳春;;CD105和CD146在乳腺癌組織中的表達[J];海南醫(yī)學院學報;2011年12期

9 孫敏;王以新;;CD146在多種腫瘤中的表達與作用[J];中國醫(yī)藥科學;2012年04期

10 郭瑞華;;CD146蛋白在胰腺癌中的表達及其臨床意義[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2011年20期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馬曉黎;;T淋巴瘤組織中CD146的表達及意義[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 記者 白毅;CD146是促慢性炎癥向腫瘤轉化重要分子[N];中國醫(yī)藥報;2014年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 郭靈華;抗CD146抗體在異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機制研究[D];蘇州大學;2016年

2 范樹穎;血清CD146在小兒原發(fā)性腎病綜合征的水平及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學;2011年

3 劉培培;IgA腎病患者腎組織及外周血中CD146的表達及意義[D];泰山醫(yī)學院;2010年

，

本文編號：640806