本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)G2-EPSPS基因玉米D-3側(cè)翼序列分析與轉(zhuǎn)化體特異性檢測(cè)方法

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【摘要】：通過一次3'端高效熱不對(duì)稱交互PCR(hiTAIL-PCR)和一次長鏈PCR擴(kuò)增方法獲得了轉(zhuǎn)抗草甘膦基因(G2-EPSPS)玉米品系D-3的外源DNA插入片段的全DNA序列(T-DNA)及兩端側(cè)翼序列,并建立了轉(zhuǎn)化體特異性PCR檢測(cè)方法。結(jié)果顯示:T-DNA插入片段全長4 318bp,由一個(gè)G2-EPSPS基因的表達(dá)盒構(gòu)成。根據(jù)T-DNA 5'、3'端側(cè)翼序列設(shè)計(jì)引物,建立了轉(zhuǎn)化體特異性檢測(cè)方法,并分析了該方法的靈敏度以及檢出限,研究結(jié)果表明,3'端定性PCR檢測(cè)方法特異性強(qiáng),靈敏度高,檢出極限為每100ng模板量的0.05%。本研究結(jié)果對(duì)轉(zhuǎn)抗草甘膦外源基因檢測(cè)和生物安全評(píng)價(jià)及監(jiān)管具有重要意義。
【作者單位】： 西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 轉(zhuǎn)基因玉米 G-EPSPS 側(cè)翼序列 轉(zhuǎn)化體特異性檢測(cè)
【基金】：轉(zhuǎn)基因重大專項(xiàng)(2014ZX0800301B) 國家自然科學(xué)基金(31370126) 國家“973”計(jì)劃(2013CB733903) 國家“863”計(jì)劃(2012AA063503)
【分類號(hào)】：S513
【正文快照】： 隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的飛速發(fā)展,轉(zhuǎn)基因作物的種植面積日益擴(kuò)大,轉(zhuǎn)基因作物的不斷商業(yè)化使得大量轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進(jìn)入人們的生活[1-2]。轉(zhuǎn)基因作物專利的保護(hù)問題、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的標(biāo)識(shí)問題、轉(zhuǎn)基因作物潛在的生態(tài)安全風(fēng)險(xiǎn)、以及轉(zhuǎn)基因食品安全問題已引起了政府和民眾的密切關(guān)注,因此當(dāng)前迫，

本文編號(hào)：604581