本文關(guān)鍵詞：豬Zfy基因干擾載體的構(gòu)建及性控效果的驗(yàn)證

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【摘要】：為了探究Zfy基因在性別控制中的作用,試驗(yàn)運(yùn)用RNAi技術(shù),設(shè)計(jì)并合成了2對(duì)靶向豬Zfy基因的shRNA序列,構(gòu)建了重組質(zhì)粒(shRNA-a,shRNA-b),將其轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的豬生精細(xì)胞中,熒光實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)生精細(xì)胞中Zfy基因mRNA的表達(dá),然后選取4頭健康公豬進(jìn)行體內(nèi)干擾試驗(yàn),分為A組和B組,每組2頭,將重組質(zhì)粒注射到豬睪丸中,A組注射shRNA-a,B組注射shRNA-b,對(duì)照組為試驗(yàn)豬場(chǎng)不進(jìn)行注射的公豬,觀察子一代性別比例。結(jié)果顯示,qRT-PCR檢測(cè)shRNA-a和shRNA-b對(duì)生精細(xì)胞中Zfy基因的抑制效率分別為33%(P0.05)和89%(P0.005)。體內(nèi)干擾試驗(yàn)中,對(duì)照組子一代仔豬雌性率為56.16%,A組、B組子一代仔豬雌性率分別為34.87%(P0.005)和47.22%(P0.05)。本試驗(yàn)成功構(gòu)建干擾豬Zfy基因的重組質(zhì)粒,并應(yīng)用于動(dòng)物試驗(yàn),證實(shí)Zfy基因可以影響后代的性別比例,在動(dòng)物性別控制中發(fā)揮一定的作用,但導(dǎo)致體內(nèi)干擾試驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期結(jié)果相反的原因仍需進(jìn)一步驗(yàn)證。
【作者單位】： 石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;內(nèi)蒙古通遼市農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全中心;
【關(guān)鍵詞】： Zfy基因 性別控制 RNAi 精子發(fā)生
【基金】：新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新基金項(xiàng)目(2014AB012)
【分類(lèi)號(hào)】：Q78
【正文快照】： Zfy基因是從Y染色體上分離而來(lái),它是在尋找Y染色體上促雄性發(fā)育基因時(shí)發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)基因,并被認(rèn)為可能是睪丸決定因子,其編碼的蛋白質(zhì)通過(guò)一個(gè)“鋅指”結(jié)構(gòu)域與DNA結(jié)合,從而調(diào)控其他基因的表達(dá),在精子的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[1-2]。早期為了驗(yàn)證Zfy基因是最主要的睪丸決定，

本文編號(hào)：559537