本文關(guān)鍵詞：家蠶BmBrat基因的克隆與鑒定

  更多相關(guān)文章： 家蠶 BmBrat基因 表達譜 抗體制備 亞細胞定位

【摘要】：NHL家族蛋白具有調(diào)控細胞增殖與分化的功能,在哺育動物中被廣泛研究。本文克隆得到家蠶NHL蛋白家族成員BmBrat基因,通過RACE技術(shù)獲得該基因cDNA全長序列為3 614 bp,其ORF為2 580 bp,編碼859個氨基酸,預(yù)測其蛋白分子量為94.3 kDa,等電點為6.65。利用RT-PCR技術(shù)檢測其在五齡3 d家蠶各組織表達情況,結(jié)果表明其在幼蟲各組織均有表達,包括絲腺、中腸、脂肪體、馬氏管等,且卵巢和頭部表達量最高;胚胎時期表達譜分析顯示其在胚胎發(fā)育第4天和第5天有高量表達。經(jīng)原核表達、蛋白純化及免疫小鼠后獲得家蠶BmBrat多克隆抗體,且Western blotting及免疫熒光檢測顯示該抗體可以特異檢測家蠶BmBrat蛋白;免疫熒光結(jié)果表明BmBrat蛋白定位于家蠶血細胞胞質(zhì)中,為進一步研究BmBrat基因的生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 家蠶 BmBrat基因 表達譜 抗體制備 亞細胞定位
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81201551) 高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金(No.20130182110003) 重慶市科委自然科學(xué)院士基金(No.CSTC2013jcyjys0007) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項資金(Nos.XDJK2013B020,SWU111014)資助~~
【分類號】：Q78
【正文快照】： NHL家族的名字源于發(fā)現(xiàn)的3 個成員:NCL-1、HT2A和LIN-41,這3 個因子與RNA代謝有關(guān)系,可能參與轉(zhuǎn)錄后基因的表達調(diào)控[1]。研究表明,NHL家族的成員均含有3 個保守的基序:1 個RING、1 個或是2 個B-box和1 個coiled-coil [2]。在調(diào)節(jié)Brat (Brain tumor) 蛋白的活性中NHL結(jié)構(gòu)起了至

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 岳珊珊;夏來新;;酵母雙雜交篩選與果蠅C(2)M相互作用的蛋白[J];遺傳;2015年11期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 潘竹;細胞非對稱分裂相關(guān)蛋白質(zhì)LGN構(gòu)象調(diào)控的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

2 陳曦;PcG蛋白在果蠅腦視葉神經(jīng)上皮細胞的作用研究[D];清華大學(xué);2014年

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王利紅;一種高效和經(jīng)濟的單克隆抗體制備新方法[J];生物技術(shù)通訊;1999年04期

2 景濤;不同免疫接種方法在單克隆抗體制備中的應(yīng)用及比較[J];中國人獸共患病雜志;2000年04期

3 高旭東;王永志;時圣鳳;李忠鵬;李小宇;徐文靜;張正坤;路揚;張佳詩;李啟云;王金剛;;膦絲菌素乙酰轉(zhuǎn)移酶的表達及單克隆抗體制備[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年05期

4 黃哲平,王健,余浩,黃萍,沈維雄,左嘉客,楊增明,申慶祥;小鼠著床絲氨酸蛋白酶2cDNA的克隆、表達及抗體制備[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報;2003年07期

5 陳紹仁,金四立,官杰,王麗芳;抗體制備方法的改進[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年01期

6 林萍,朱筱娟,李紹巍,費青;心肌肌球蛋白輕鏈單克隆抗體制備[J];白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1996年06期

7 王文聰;;單克隆抗體制備中幾個關(guān)鍵問題[J];西昌農(nóng)業(yè)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;2002年02期

8 張琳,游上游,黃亦鈞,胡遠貴,黃巍,楊軍;心肌鈣蛋白T單克隆抗體制備及應(yīng)用[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2000年03期

9 方瑾，劉寧，周云龍，，錢曉菁，陳令靜，梁華，鞠振林，潘香剛;蕨精子單克隆抗體制備Ⅰ：確定精子抗原性[J];植物學(xué)通報;1994年S1期

10 歐陽斌;劉燕;陳敬;史良如;;抗酶單克隆抗體制備中檢測方法的探討[J];生物制品學(xué)雜志;1990年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 肖艷群;張健;陳慧英;邵維杰;蔣玲麗;簡敏華;陸銀華;徐

本文編號：543468