本文關(guān)鍵詞：水牛ghrelin基因原核表達載體構(gòu)建與蛋白表達

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【摘要】：為了研究水牛ghrelin基因的結(jié)構(gòu)與功能,本試驗對水牛ghrelin基因進行原核表達載體構(gòu)建與融合蛋白表達條件的優(yōu)化。采用RT-PCR方法從水牛胃組織的總RNA中擴增出ghrelin編碼區(qū),連接到pRSET-a載體中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),挑取陽性克隆子,用IPTG進行誘導表達條件的優(yōu)化。結(jié)果表明,成功構(gòu)建原核表達載體pRSET-a-ghrelin,在2 mmol/L IPTG,37℃的條件下誘導表達4 h,水牛ghrelin重組蛋白可成功獲得表達,經(jīng)SDS-PAGE鑒定發(fā)現(xiàn),ghrelin融合蛋白主要以包涵體形式存在,分子量約為20 ku,其表達量占總菌體蛋白量的35%。本試驗結(jié)果為進一步研究水牛ghrelin基因的結(jié)構(gòu)和功能提供有價值的生物學信息。
【作者單位】： 廣西中醫(yī)藥大學;廣西大學動物科學技術(shù)學院;
【關(guān)鍵詞】： Ghrelin 水牛 基因克隆 原核表達
【基金】：廣西自然科學基金資助項目(2014GXNSFBA118140) 廣西大學科研基金資助項目(XBZ130294)
【分類號】：S823.83
【正文快照】： ghrelin是一個由28個氨基酸殘基組成的內(nèi)源性肽類激素,主要由胃組織分泌,與生長激素促分泌素受體(growth hormone secretagogue receptor,GHS-R)結(jié)合發(fā)揮促進生長激素(growth hormone,GH)分泌的作用[1]。人、嚙齒類動物和豬ghrelin結(jié)構(gòu)高度保守[2-3],ghrelin的第三位絲氨酸N-

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1 杜改梅,趙茹茜;Ghrelin及其生物學功能[J];畜牧與獸醫(yī);2005年07期

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3 耿春銀;楊連玉;張敏;嚴昌國;;Ghrelin對采食和分泌調(diào)節(jié)作用的研究進展[J];飼料工業(yè);2008年19期

4 王家鄉(xiāng);彭克美;李鵬;金升藻;;禽類Ghrelin研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2011年09期

5 劉璐;夏利寧;姚剛;趙紅瓊;;反芻動物Ghrelin研究進展[J];動物醫(yī)學進展;2013年06期

6 馬勇江;葉遠蘭;張媛;李玉谷;;腦腸肽激素Ghrelin及其在動物生產(chǎn)中的應用展望[J];家畜生態(tài)學報;2006年06期

7 耿春銀;劉佳佳;李德莉;王淑潔;楊連玉;;融合基因Ghrelin/GHRH真核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及其促生長效應[J];畜牧與獸醫(yī);2008年05期

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9 張小宇;云占林;郭鳳英;郭志凱;;牛卵巢中Ghrelin mRNA的表達[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2012年09期

10 李英;馬勇江;李玉谷;;Ghrelin的免疫調(diào)節(jié)作用[J];動物醫(yī)學進展;2008年02期

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1 火焱;楊銀鳳;王秀梅;;生長素-Ghrelin的研究進展[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十四次學術(shù)研討會論文集[C];2006年

2 蘇娟;雷治海;張文龍;武楓林;施玉萍;姚遠;楊桂紅;;Ghrelin對豬生殖調(diào)節(jié)的體外研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十六次學術(shù)研討會論文集[C];2010年

3 葉遠蘭;魏鳳梅;李玉谷;張媛;馬勇江;李楚宣;鄧銜柏;江青艷;;禁食對雞下丘腦神經(jīng)元表達Ghrelin的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十五次學術(shù)研討會論文集[C];2008年

4 賈翠平;雷治海;蘇娟;張文龍;武楓林;施玉萍;;兔ghrelin組織分布及其基因克隆的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十五次學術(shù)研討會論文集[C];2008年

5 毛峗杰;林金杏;曾衛(wèi)東;張才喬;;Ghrelin對雞等級前卵泡發(fā)育的影響[A];全國動物生理生化第十一次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

6 曹月勝;吳明明;蔣亞軍;劉劍飛;遲曉瑤;孫靜;孫金海;;豬Ghrelin基因cDNA全長克隆[A];第十二次全國畜禽遺傳標記研討會論文集[C];2010年

7 楊銀鳳;朱雪敏;都格爾斯仁;;馴鹿生長素Ghrelin全長cDNA的克隆及序列分析[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十五次學術(shù)研討會論文集[C];2008年

8 陳黎龍;江青艷;朱曉彤;;雞Ghrelin研究進展[A];全國動物生理生化第九次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2006年

9 梅宗香;束剛;朱曉彤;王松波;高萍;江青艷;;Ghrelin對雞血液淋巴細胞增殖和細胞因子表達的影響[A];全國動物生理生化第十次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2008年

10 李江;尹帆;馬勇江;張媛;李英;李玉谷;;Ghrelin對雌激素誘導小鼠胸腺細胞凋亡的抑制作用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖學及組織胚胎學分會第十七次學術(shù)研討會論文集（上）[C];2012年

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1 杜改梅;斷奶仔豬胃腸道Ghrelin表達及其對胃功能的調(diào)節(jié)[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

2 楊燕燕;Ghrelin對綿羊早期胚胎發(fā)育影響的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2014年

3 王琳;Ghrelin對大鼠下丘腦—垂體—性腺的影響及其機理研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2010年

4 杜晨光;綿羊卵巢及早期胚胎中Ghrelin的表達[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2008年

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6 米焱;Ghrelin對體外牛卵丘細胞增殖和卵母細胞成熟影響的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2013年

7 呂東媛;Ghrelin在烏珠穆沁羊雌性生殖道內(nèi)的表達及其真核表達載體的構(gòu)建[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2008年

8 王家鄉(xiāng);非洲雛鴕鳥消化管的發(fā)育及Ghrelin在其中分布規(guī)律的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2010年

9 張愛玲;黃牛Orexin和Ghrelin基因遺傳多樣性研究暨Ghrelin基因高效原核表達系統(tǒng)構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學;2007年

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1 張娜;牦牛Ghrelin對其極端生境適應的分子機理[D];蘭州大學;2016年

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3 李加龍;牦牛Ghrelin基因的克隆及其在“下丘腦—垂體—胃”軸上的表達機理[D];蘭州大學;2012年

4 徐金霞;小鼠生后不同發(fā)育階段睪丸組織Ghrelin的表達[D];西北農(nóng)林科技大學;2013年

5 楊靜;Ghrelin及其基因在不同時期小鼠卵巢和子宮的定位研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學;2011年

6 宋艷華;Ghrelin在蒙古綿羊卵泡顆粒細胞及其擬黃體化過程中的表達[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2008年

7 梁建榮;蒙古綿羊Ghrelin cDNA的克隆和原核表達[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2011年

8 楊雪麗;Ghrelin在正常及鴨肝炎病毒感染雛鴨體內(nèi)分布的動態(tài)觀察[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2008年

9 耿春銀;豬Ghrelin基因質(zhì)粒對小鼠的促生長效應研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2007年

10 元艷;Ghrelin在天府肉鴨免疫器官內(nèi)動態(tài)表達的研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2012年

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