抗蟲基因cry1Ab13在大豆中的遺傳轉化及抗蟲性鑒定
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【摘要】:cry1Ab13基因是抗蟲基因,編碼的殺蟲晶體蛋白對鱗翅目害蟲具有一定的毒殺作用,構建了植物表達載體pCambia3300-35S-cry1Ab13,通過花粉管通道法將該載體轉入大豆品種吉農28中,經PCR擴增檢測得到15株T_1代陽性植株。Southern blotting分析顯示有5株出現(xiàn)雜交信號,并以單拷貝形式整合到大豆基因組中。熒光定量PCR測定結果表明:cry1Ab13基因在轉化植株的葉、莖稈中均有表達,每株表達量各不相同,在葉片部位表達量相對較高,最高為6.7,最低為2.5;在莖部表達量最高為0.76,最低為0.31。對T_1代陽性植株籽粒,采用圓盤分隔法接入大豆食心蟲幼蟲,進行初步抗蟲試驗,結果顯示轉化植株抗蟲效果明顯,但后代穩(wěn)定性還需進一步研究。
【作者單位】: 吉林農業(yè)大學生物技術中心;長春八一醫(yī)院;
【關鍵詞】: 大豆 cryAb基因 植物表達載體 抗蟲
【基金】:轉基因生物新品種培育重大專項(2014ZX08004-004)
【分類號】:S435.651
【正文快照】: 大豆蟲害是影響大豆產量和質量的一個重要因素。1991-2010年我國大豆蟲害發(fā)生面積從4.93 697×106次·hm-2增至8.344 06×107次·hm-2,蟲害發(fā)生強度從0.70%增至1.02%[1]。大豆食心蟲(Leguminivora glycinivorella Matsumura)、豆天蛾(Clanis bilineata)、大豆卷葉螟(Lamprosem
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,本文編號:489099
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