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結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv mazEF3基因過(guò)表達(dá)菌株的構(gòu)建及初步鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-06-26 20:02

  本文關(guān)鍵詞:結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株H37Rv mazEF3基因過(guò)表達(dá)菌株的構(gòu)建及初步鑒定,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:為構(gòu)建H37Rv mazEF3基因的過(guò)表達(dá)菌株,檢測(cè)過(guò)表達(dá)菌株mazEF3 mRNA表達(dá)水平。使用穿梭質(zhì)粒pMV361,把mazEF3基因連入其中,構(gòu)建重組質(zhì)粒pMV361-mazEF3;利用電穿孔技術(shù),將穿梭表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入H37Rv中,并將該菌涂在卡那霉素培養(yǎng)基上初步篩選,提取陽(yáng)性菌株質(zhì)粒進(jìn)行PCR、雙酶切后送公司測(cè)序進(jìn)一步驗(yàn)證;檢測(cè)不同電轉(zhuǎn)電壓下mazEF3 mRNA表達(dá)水平,尋找最佳電轉(zhuǎn)電壓。結(jié)果顯示,成功構(gòu)建H37Rv mazEF3基因的過(guò)表達(dá)菌株,PCR、雙酶切后目的基因,測(cè)序結(jié)果與已知mazEF3基因比對(duì),同源性100%。實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè),電轉(zhuǎn)電壓為2300V時(shí),構(gòu)建的過(guò)表達(dá)菌株mazEF3 mRNA表達(dá)量最高。由此可知,成功構(gòu)建及初步鑒定了mazEF3 mRNA過(guò)表達(dá)菌株,電轉(zhuǎn)電壓為2300V時(shí),構(gòu)建的過(guò)表達(dá)菌株mazEF3 mRNA表達(dá)量最高。
【作者單位】: 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】結(jié)核分枝桿菌 mazEF 毒素-抗毒素系統(tǒng) 過(guò)表達(dá)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81341079,81560262)
【分類(lèi)號(hào)】:R378.911
【正文快照】: 結(jié)核病(tuberculosis,TB)是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteria tuberculosis,MTB)感染引起的慢性傳染病,是一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。結(jié)核病發(fā)病人數(shù)始終位居甲、乙兩類(lèi)傳染病前列,每年死亡人數(shù)超過(guò)200萬(wàn)。隨著人口流動(dòng)性的增加、MTB耐藥率的增加、艾滋病等免疫缺陷疾病日益增多,結(jié)

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1 李靖云;胡瑞;杜秋妹;尹相云;王婷婷;王東輝;張立國(guó);;死亡受體6的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域?qū)ζ鋪喖?xì)胞定位的調(diào)節(jié)[J];生物物理學(xué)報(bào);2014年02期

2 ;[J];;年期


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本文編號(hào):487379

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