稻穗是水稻的收獲部位,其形態(tài)發(fā)育與產(chǎn)量密切相關(guān)。本研究對(duì)日本粳型常規(guī)水稻（Oryza sativa L.）Kitaake進(jìn)行EMS誘變處理,在M₂代獲得一份小穗異常突變體。經(jīng)連續(xù)多代自交后發(fā)現(xiàn),該突變性狀能夠穩(wěn)定遺傳,暫時(shí)將其命名為ossp1。通過農(nóng)藝性狀調(diào)查、生長發(fā)育動(dòng)態(tài)觀察、外源激素處理、內(nèi)源激素測(cè)定、細(xì)胞學(xué)分析、基因定位、圖位克隆、四引物受阻分子標(biāo)記、生物信息學(xué)分析與qRT-PCR定量分析等研究方法,對(duì)控制該突變性狀的基因進(jìn)行克隆,分析其表達(dá)模式。具體研究結(jié)果如下:1.通過對(duì)突變體進(jìn)行表型鑒定發(fā)現(xiàn),相較于野生型KTK,除粒長有所增加外,突變體ossp1的株高、分蘗數(shù)、結(jié)實(shí)率、千粒重及有效穗粒數(shù)等主要產(chǎn)量性狀都顯著減少。其發(fā)芽進(jìn)程滯后,種子活性和花粉育性顯著降低。莖部和穗部的內(nèi)源激素GA、IAA、CTK含量都表現(xiàn)出下降趨勢(shì)。突變體ossp1的小穗在幼穗發(fā)育期與野生型并無明顯差異。但在籽粒蠟熟期,突變體的內(nèi)外護(hù)穎呈現(xiàn)出明顯的增長變寬,其穎果形態(tài)變得細(xì)長,千粒重下降33.1%。細(xì)胞學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)突變體ossp1的護(hù)穎細(xì)胞與穎殼細(xì)胞明顯比野生型增長,細(xì)胞結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)明顯硅化,...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.水稻小穗和花序的形態(tài)結(jié)構(gòu)
    2.花器官發(fā)育模型
        2.1 ABC模型
        2.2 ABCDE模型
        2.3 水稻ABCDE類功能基因
    3.水稻花序發(fā)育
        3.1 水稻花序結(jié)構(gòu)
        3.2 水稻花序發(fā)育過程
    4.水稻小穗發(fā)育
        4.1 水稻小穗結(jié)構(gòu)
        4.2 水稻穗發(fā)育過程
    5.水稻護(hù)穎研究進(jìn)展
    6.水稻小穗發(fā)育研究進(jìn)展
    7.ASP1 基因研究進(jìn)展
    8.水稻基因定位和克隆的研究
        8.1 分子標(biāo)記在水稻研究中的應(yīng)用
        8.2 構(gòu)建水稻分子遺傳連鎖圖譜
        8.3 水稻基因的定位
        8.4 水稻基因克隆
            8.4.1 基于作物功能蛋白質(zhì)序列的基因克隆
            8.4.2 基于基因表達(dá)差異的基因克隆
            8.4.3 基于基因加標(biāo)簽的基因克隆
            8.4.4 基于基因序列的基因克隆
            8.4.5 基于基因遺傳圖譜的基因克隆
    9.實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙饬x
第二章 材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試材料
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2.實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 農(nóng)藝性狀調(diào)查
        2.2 生長與發(fā)育動(dòng)態(tài)觀察
            2.2.1 室內(nèi)發(fā)芽試驗(yàn)
            2.2.2 種子活力觀察
            2.2.3 根部生長性狀觀察
            2.2.4 相關(guān)激素的測(cè)定
        2.3 組織細(xì)胞學(xué)觀察與花粉育性鑒定
        2.4 遺傳分析與群體構(gòu)建
        2.5 突變體ossp1 的基因定位
            2.5.1 遺傳圖譜的構(gòu)建與測(cè)序分析
            2.5.2 CTAB法提取水稻基因組DNA
            2.5.3 PCR擴(kuò)增分析
            2.5.4 瓊脂糖凝膠電泳
            2.5.5 目的片段回收
        2.6 共分離鑒定
        2.7 OsSP1 基因的生物信息學(xué)分析
        2.8 OsSP1 的組織特異性表達(dá)分析
            2.8.1 Trizol法提取RNA
            2.8.2 RNA純化
            2.8.3 反轉(zhuǎn)錄
            2.8.4 qRT-PCR
第三章 結(jié)果與分析
    1.ossp1 的表型特征與主要農(nóng)藝性狀表現(xiàn)
    2.生長與發(fā)育動(dòng)態(tài)觀察
        2.1 節(jié)間觀察和分析
        2.2 ossp1 的花器官形態(tài)與花粉育性觀察
        2.3 相關(guān)激素的生理生化測(cè)定
    3.ossp1 的組織細(xì)胞學(xué)觀察
    4.ossp1 的遺傳分析與基因定位
    5.候選基因的篩選和測(cè)序驗(yàn)證及生物信息學(xué)分析
    6.ossp1 的表達(dá)模式分析
        6.1 OsSP1 基因的組織特異性表達(dá)分析
        6.2 花發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)
第四章 討論與結(jié)論
    1.討論
        1.1 OsSP1 編碼一個(gè)TPR/TPL轉(zhuǎn)錄輔抑制因子
        1.2 OsSP1 與其它穎花發(fā)育基因、生長素信號(hào)通路基因可能存在互作的分子機(jī)制
        1.3 OsSP1是ASP1 的新等位基因
    2.展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：4047764