為了研究關(guān)嶺牛PPAP2B基因mRNA在不同組織中的表達(dá)水平及相關(guān)功能,試驗(yàn)以關(guān)嶺牛為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,分別提取心臟、肝臟、小腸、脂肪、大腿肌、背最長(zhǎng)肌組織的總RNA,以不同組織的總RNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,以GAPDH基因作為內(nèi)參,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)PPAP2B基因mRNA在不同組織中的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果:關(guān)嶺牛PPAP2B基因mRNA在脂肪中表達(dá)量最高,在其他組織中表達(dá)量很少甚至幾乎不表達(dá)。結(jié)論:PPAP2B基因可能在牛的脂肪沉積過(guò)程中發(fā)揮作用。

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【部分圖文】：

圖1 總RNA的2100分析儀檢測(cè)結(jié)果

由圖1可見(jiàn):各組織中提取的RNA經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，18S和28S條帶清晰，無(wú)明顯擴(kuò)散現(xiàn)象。經(jīng)超微量紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，RNA濃度適中，質(zhì)量較好，可用于下一步實(shí)驗(yàn)。2.2實(shí)時(shí)熒光定量PCR產(chǎn)物的特異分析

圖2 關(guān)嶺牛PPAP2 B基因q RT-PCR溶解曲線(xiàn)和擴(kuò)增曲線(xiàn)

通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)得到目的基因PPAP2B和內(nèi)參基因GAPDH的溶解曲線(xiàn)及擴(kuò)增曲線(xiàn)(見(jiàn)圖2、圖3)。二者的擴(kuò)增曲線(xiàn)拐點(diǎn)清晰，斜率較高，均呈S型，表明擴(kuò)增效率較高;溶解曲線(xiàn)均為光滑的單峰曲線(xiàn)，Tm溫度附近無(wú)明顯雜峰，表明引物特異性和重復(fù)性好，無(wú)引物二聚體出現(xiàn)，符合試驗(yàn)的質(zhì)....

圖3 關(guān)嶺牛GHPDA基因q RT-PCR溶解曲線(xiàn)和擴(kuò)增曲線(xiàn)

圖2關(guān)嶺牛PPAP2B基因qRT-PCR溶解曲線(xiàn)和擴(kuò)增曲線(xiàn)2.3PPAP2B基因mRNA在不同組織的相對(duì)表達(dá)量

圖4 關(guān)嶺牛PPAP2 B基因m RNA在不同組織中的相對(duì)表達(dá)量

由圖4可見(jiàn):關(guān)嶺牛PPAP2B基因mRNA在脂肪組織中的相對(duì)表達(dá)量高達(dá)34.4556，顯著高于其他組織(P<0.05);其次為小腸、心臟、肝臟、大腿肌;在背最長(zhǎng)肌組織中最低，只有0.0333。3結(jié)論

本文編號(hào)：4042903