目的:分析自身免疫性甲狀腺疾病遺傳易感基因啟動(dòng)子區(qū)DNA甲基化水平,比較病例對(duì)照組間啟動(dòng)子區(qū)DNA甲基化水平差異,選取顯著性差異的位點(diǎn),進(jìn)一步擴(kuò)大樣本驗(yàn)證,為尋找自身免疫性甲狀腺疾病的表觀遺傳標(biāo)志提供理論依據(jù)。方法:按照病例對(duì)照組的納入標(biāo)準(zhǔn)選取2016年6月至2017年6月在我科住院患者22例,其中對(duì)照組5例,病例組17例,收集資料并抽取外周血標(biāo)本提取DNA,通過亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化、PCR擴(kuò)增、體外轉(zhuǎn)錄等方法進(jìn)行甲基化定量檢測(cè),發(fā)現(xiàn)甲基化差異顯著的位點(diǎn)后擴(kuò)大樣本量,驗(yàn)證樣本選取對(duì)照組35例、病例組64例,對(duì)該位點(diǎn)所在引物檢測(cè)序列進(jìn)一步進(jìn)行分析該序列的甲基化程度。結(jié)果:去除了擴(kuò)增失敗的6個(gè)位點(diǎn)和完全無甲基化的3個(gè)位點(diǎn),得到15個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)CTLA4第5個(gè)位點(diǎn)、CD40第11個(gè)位點(diǎn),IL2RA第21、22、23位點(diǎn)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且病例組均處于低甲基化狀態(tài),其中CD40第11個(gè)位點(diǎn)病例對(duì)照組差異更明顯(P<0.001)。因此選擇CD40的編號(hào)第11位點(diǎn)進(jìn)行擴(kuò)大樣本量驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)檢測(cè)的20個(gè)CpG位點(diǎn)中部分位點(diǎn)在病例對(duì)照組間存在明顯差異(P<0.05)結(jié)論:病例對(duì)照組間的甲基...

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1兩組CD40-3片段中CpG位點(diǎn)的甲基化水平Fig.1MethylationlevelsoftheCpGsitesintheCD40-3fragmentbetweentwogourps

而病例組無甲基化；其他位點(diǎn)在病例對(duì)照組間均存在一定程度的甲基化，但是病例對(duì)照組間的甲基化率不同，如CG11位點(diǎn)的平均甲基化率在病例組0.60，而對(duì)照組為0.75，且病例組均處于低甲基化狀態(tài)（見表6、圖1）圖1兩組CD40-3片段中CpG位點(diǎn)的甲基化水平Fig.1Methyla....

本文編號(hào)：4031779