發(fā)布時間：2025-01-05 20:39

　　瓊膠酶是一種能夠降解瓊脂以形成瓊脂糖寡糖的糖苷水解酶,根據(jù)瓊膠酶水解糖苷鍵的不同,可以分為α-瓊膠酶(EC 3.2.1.158)與β-瓊膠酶(EC 3.2.1.81)兩類。目前,野生菌株生產(chǎn)瓊膠酶存在諸多問題,缺點包括產(chǎn)酶量低、易污染、生長慢等,不利于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)�；谝陨蠁栴},本課題將一段弧菌瓊膠酶蛋白基因重組于表達(dá)載體pET30a(+)上,然后轉(zhuǎn)入宿主大腸桿菌BL21體內(nèi),通過宿主大腸桿菌的快速繁殖來實現(xiàn)瓊膠酶的大量生產(chǎn)。構(gòu)建成功的工程菌不僅產(chǎn)酶量高而且具有不易被雜菌污染、生長快的優(yōu)點,這樣為瓊膠酶在今后工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)提供理論依據(jù)。1.在本研究中,首先我們利用基因合成的方法合成了已報道的弧菌瓊膠酶的基因,通過分子生物學(xué)手段將合成的弧菌瓊膠酶基因aga2插入原核表達(dá)載體pET30a(+)中,并轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞大腸桿菌BL21(DE3)中,構(gòu)建成pET30a(+)-aga2重組表達(dá)載體。2.對構(gòu)建的重組子進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),利用DNS法測定瓊膠酶酶活,對誘導(dǎo)條件和表達(dá)的瓊膠酶酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行探究。構(gòu)建成功的重組表達(dá)載體pET30a(+)-aga2,在IPTG(異丙基-β-D-硫代半乳糖苷)誘導(dǎo)...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

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圖３－１?ＰＥＴ３０ａ?（＋）表達(dá)載體??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｔｈｅ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｏｆ?ＰＥＴ３０ａ?（＋）??

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本文編號：4023232