�、裥透蓴_素是天然免疫系統(tǒng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用的細胞因子。Ⅰ型干擾素受體(Interferon-α/β receptor,IFNAR)結(jié)合配體Ⅰ型干擾素后激活下游JAK-STAT等信號轉(zhuǎn)導途徑,誘導干擾素誘導基因(Interferon stimulated gene,ISG)轉(zhuǎn)錄。低親和力Ⅰ型干擾素受體 1(Type Ⅰ IFN receptor 1,IFNAR1)是保障完整IFNAR活化必不可少的組成部分。本試驗以慢病毒介導的CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)構(gòu)建IFNAR1基因穩(wěn)定敲除豬腎上皮PK15細胞系。首先設(shè)計單鏈引導RNA(Single guide RNA,sgRNA)構(gòu)建重組質(zhì)粒plFNAR1-sgRNA;然后將重組質(zhì)粒與pMD2.G和psPAX2慢病毒包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)到人胚胎腎細胞(Human embryonic kidney 293T/17,HEK293T/17)收取慢病毒液;用該慢病毒液感染PK15細胞并通過嘌呤霉素(Puromycin,Puro)篩選獲得IFANR1基因敲除的多克降細胞系;最終通過有限稀釋的方法獲得PK15-IFNAR1-/-單克隆細胞系。酶標儀檢測CCK-8...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１天然免疫中的模式識別受體ｌ｜９ｌ??Ｉｒｉｇ?１?Ｐａｔｔｅｒｎ?ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ?ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ?ｉｎ?ｉｎｎａｔｅ?ｉｍｍｕｎｅ１１９１??１．２．１．１?Ｔｏｌｌ樣受體家族??

?河南農(nóng)業(yè)大學２０１９屆碩上研宄生學位論文???ＴＬＲｓ?ＲＬＲｓ?ＤＮＡ?ＮＬＲｓ?ＡＬＲ??ｓｅｎｓｏｒｓ???ＬＤ?ｚ＝３＝：???ＴＬＲｓ?ｔｍｍ?ｍ??ＵＲＳ?辱?■?Ｉ?｜??－－Ｔ－ｉ?等?Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ?▼?＇Ｗ??Ｈｂ??ｉ?Ｉ?、祕＇??Ｉ?Ｉ?＊?....

圖５?ＰＲＶ結(jié)構(gòu)圖【８６】??Ｆｉｇ．５?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＰＲＶ?＼?ｉｒｉｏｎ．［８６Ｊ??１．５．３ＰＲＶ與天然免疫??

２１?ＵＬ２５??ｇＣ？?（ＵＳ４）?ＵＩＡ１?ＵＬ４Ｉ?（ＶＨＳ）?ＵＩ３８（ＶＰ１９ｃ）??ｓＬ（ｉｎ．ｌ）?ＵＬ：Ｖ７?ＵＩ３５?（ＶＰ２６）??ｇＭ?（ＵＵＯ）?ＵＬ５６?（?ＶＰ?１／２）??ｇＨ?（ＵＬ２２）?ＵＩ－４６＜ＶＰ１Ｉ／１２＞??ｇＣ?（ＶＩＭ）?ＵＬ４７....

圖１３／廠；以／？／基因敲除對ＰＲＶ－ＱＸＸ病毒滴度的影響??Ｉ＇ｉｇ?１３?Ｉ?ｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ＩＦＮＡＲＩ?ｇｅｎｅ?ｋｎｏｃｋｏｕｔ?ｏｎ?ＰＲＶ－ＱＸＸ?ｖｉｒｕｓ?ｔｉｔｅｒｓ??

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本文編號：4017670