背景:阿爾茲海默病(Alzheimer’s Disease,AD)是與增齡相關(guān)、以漸進性認知功能障礙和記憶減退為主要癥狀、最常見的癡呆類型。作為老年期復(fù)雜中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性變性疾病,AD具有多基因遺傳背景,且發(fā)病機制復(fù)雜。膽固醇代謝穩(wěn)態(tài)失調(diào)與認知功能障礙和AD有關(guān),膽固醇調(diào)節(jié)相關(guān)的遺傳變異也關(guān)聯(lián)認知功能障礙和AD風(fēng)險,然其機制依然不清。因此,在基因組和轉(zhuǎn)錄組水平開展AD病因?qū)W相關(guān)的系統(tǒng)研究將有助于探索AD的病因、生物標志物和致病機制,具有潛在的臨床實際應(yīng)用價值。目的:1、在中國AD人群中識別新的AD風(fēng)險相關(guān)膽固醇調(diào)節(jié)基因遺傳變異及驗證候選AD風(fēng)險相關(guān)基因變異并進行功能分析。2、在課題組前期研究基礎(chǔ)上開展膽固醇調(diào)節(jié)基因APOC1體外分子機制研究,初步探索AD潛在的致病機制。3、探索功能相關(guān)AD轉(zhuǎn)錄組水平差異表達譜。方法:1、在854例AD患者、1059例AD源性輕度認知功能障礙(MCI-AD)患者和1254例認知正常老年對照共計3167例樣本中,對12個膽固醇調(diào)節(jié)相關(guān)核受體基因和APOE共計13個基因進行靶向測序,篩選潛在變異并進行識別、驗證和初步功能分析。2、利用分子微陣列質(zhì)譜分型平臺...

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖3pGL3-promotor結(jié)構(gòu)示意圖

北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文重復(fù)，測定吸光度（０Ｄ）值；??待ＡＰ４０反應(yīng)孔顯色３０ｍｉｎ后，加入ｓｔｏｐ?ｓｏｌｕｔｉｏｎｌＯＯ＾Ｌ于每空內(nèi)，吹打混？?Ｉｎｆｉｎｉｔｅ?２０００?ｐｒｏ?酶標儀測定?ＯＤ?值；??取梯度標準品ＯＤ值，利用Ｃｕｒｖｅ?ｅｘｐｅｒｔ?ｖｌ４．０軟件建....

圖8pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR結(jié)構(gòu)示意圖

用ＰＬＩＮＫ１．９０對據(jù)進行質(zhì)后進行關(guān)聯(lián)分目標變異致病性分析。??固醇調(diào)節(jié)基因ＡＰ０Ｃ７體外研宄??課題組前期薈萃（ｍｅｔａ）分析發(fā)現(xiàn)，在東亞人群、高加索人群和西班牙裔人群醇調(diào)節(jié)基因ＡＰＯＣＪ基因變異增加ＡＤ患病風(fēng)險發(fā)現(xiàn)ｎ。同時，基于本課題組的ＡＤ隊列人群研究，ＪＰＯＣ７基因變異....

圖１１慢病毒包裝流程??Ｆｉｇｕｒｅ?１１?Ｆｌｏｗｃｈａｒｔ?ｏｆ?Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ?ｐａｃｋａｇｉｎｇ??

??包裝流程如圖１１所示。將ｐｌｅｎｔｉ６．３－ＥＧＦＰ－ＡＰＯＣｌ慢病毒載體和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染??ＨＥＫ２９３Ｔ細胞獲得病毒顆粒，采用ＲＴ－ｑＰＣＲ法檢測靶基因ＲＮＡ水平。??Ｏ?Ｃ?二＞?？鴒?１?〇??〇?＇?ｗ：?？??病毐＆包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染靶細胞收獲病毒顆粒濃縮滴度檢測??....

圖１３鏈特異性ＲＮＡ－ｓｅｑ數(shù)據(jù)分析流程圖??Ｆｉｇｕｒｅ?１３?Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＲＮＡ－ｓｅｑ?ｄａｔａ??１、ｍＲＮＡ分析??（１）原始測序數(shù)據(jù)（ｒａｗ?ｄａｔａ）分析和質(zhì)控??

北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文控??庫??序??、雜交及稀釋??ｔｅｒ）生成：將流動池（Ｆｌｏｗｃｅｌｌ）和準備好的文庫在ｃＢｏｔ測序：將完成簇生成的流動池轉(zhuǎn)移到測序儀上，選擇正確據(jù)分析??所示，對測序得到的原始雙端序列進行質(zhì)控和過濾后，行比對，基于比對結(jié)果分別進行標準分析和高級分析....

本文編號：3953980