發(fā)布時間：2024-03-30 17:31

　　水稻Xa7基因是一個具有高抗、廣譜持久抗性的抗白葉枯病基因。對水稻抗病基因Xa7展開克隆研究,不僅能夠豐富關于植物抗病分子機制相關的理論知識,同時也給與抗病分子育種提供了一個新的抗源。在前期的研究中,本實驗室利用鎮(zhèn)恢084與成恢448雜交構建群體進行圖位克隆,結合對IRBB7和IR24的BAC文庫測序?qū)a7基因精細定在約120kb區(qū)間內(nèi)。但是由于定位區(qū)間內(nèi)基因組序列與常規(guī)水稻存在很大差異,無法利用F2代群體的染色體交換對Xa7進行進一步精細定位。本研究通過對鎮(zhèn)恢084進行輻射誘變,在10000個M1株系中,篩選得到3個高度感病突變體。利用PCR對定位區(qū)間進行擴增,篩選到一個Xa7定位區(qū)間染色體發(fā)生大片段缺失的突變體ZM2。遺傳分析表明鎮(zhèn)恢084與ZM2雜交F1抗病,F2群體抗感分離比為3:1,感病表型與缺失位點緊密連鎖。日本晴與ZM2雜交F1感病,F2群體全部感病。通過對感病突變體基因組的高通量測序比對分析,在Xa7定位區(qū)間染色體缺失了大小為106kb片段,與之前定位的120kb有25kb的重疊區(qū),最終將Xa7定為位在25kb的區(qū)間內(nèi)。通過生物信息學分析,在這25kb區(qū)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)有2個...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１植物對細菌抗性進化模型??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｔｏ?ｂａｃｔｅｒｉａ??

．．病原菌抑制植物的防御反應主要是通過分泌些與植物防ＴＩ反應相關的蛋??白質(zhì)。往往在植物的防御反應被抑制的同吋，病原菌的毒性也得到很大的提高。??黃單胞桿菌具有多種分泌機制，而其中的ＩＩＩ型分泌系統(tǒng)（Ｔ３Ｓ）勹其致病性是最??緊密相關的。??ＩＩＩ型分泌系統(tǒng)是一種由Ｈｒｐ基因簇編....

圖1.2avrBs3家族的結構lulFig.1.2ConstructiveofavrBs3familyprotein

目前已經(jīng)克隆的ＴＡＬ效應因子有：ＡｖｒＸａ２７、ＰｔｈＸｏｌ、ＰｔｈＸｏ３、ＡｖｒＸａ３、??八￥１＾５、八丫以３７、八丫以３１０、卩仆＼〇６』出乂〇７和八￥＾３２３。丁八［效應因子卩仆＼〇１??和ＰｔｈＸｏ３以及ＡｖｒＸａ７這３種效應因子可以誘導ＭｔＮ３／ｓａｌｉｖａ／ＳＷＥＥ....

圖２．１感病突變體接菌驗證??Ｆｉｇ．?２．１?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ?ｍｕｔａｎｔｓ??

３．２利用ＰＣＲ方法篩選定位區(qū)間染色體發(fā)生缺失的突變體??利用實驗室自主開發(fā)的分子標記，對抗感分離植株（ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５）進??行辦７連鎖分子標記分析（如圖２．２）。經(jīng)過人量的分子標記驗證，發(fā)現(xiàn)當在??定位區(qū)間內(nèi)分子標記ＳＭ２０對ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５感病突變體進行鑒定分析....

圖2.3感病突變體ZM2的遺傳分析

晴為父本進行雜交獲得Ｆｉ，并對其進行繁殖，獲得Ｆ２。在金華對ＦｊＰＦ２植，在分蘗期對群體進行接菌，調(diào)查發(fā)現(xiàn)鎮(zhèn)恢０８４與ＺＭ２雜交Ｆ１抗體抗感分離比為３：１，感病表型與缺失位點緊密連鎖。日本晴與ＺＭ２病，Ｆ２群體全部感病。進一步驗證了?ＺＭ２感病突變體的突變是由染色成的。??因此在....

本文編號：3942698