MGST1基因調控雞胚肝細胞的分子機制研究
發(fā)布時間:2024-02-23 19:26
過氧化物酶(Peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)和谷胱甘肽過氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)形成了第一道抗氧化防御線,這道防御線共同發(fā)揮作用來抵御活性氧對機體造成的損傷。在雞胚發(fā)育的過程中,這些酶從休眠態(tài)轉化為激活態(tài),為雞胚的正常生長發(fā)育提供保障。在不同孵化階段,不同組織器官內的活性也存在較大差異。本研究基于課題組前期篩選出的調控抗氧化酶活性的關鍵基因微粒體谷胱甘肽轉移酶1(Microsomal glutathione transferase 1,MGST1),對目的基因進行RNA干擾,通過轉錄組測序技術鑒定干擾組(GR)和空白組(KB)的差異表達基因,以期找出MGST1調控抗氧化酶活性的分子機制。試驗結果如下(1)雞胚原代肝實質細胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化:選擇將孵化至12 d-20 d的雞胚蛋作為試驗原材料,從雞胚胚齡的選擇、胰蛋白酶消化液的濃度及消化時間、胎牛血清類型及血清濃度、細胞生長因子等幾個方面對原代培養(yǎng)雞胚肝實質細胞的分離和培養(yǎng)條件進行摸索,最后選取雞胚胚齡為16天、胰蛋白酶消化液濃度...
【文章頁數(shù)】:74 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3907851
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圖1.1RNAi的啟動階段
合肥工業(yè)大學專業(yè)碩士研究生學位論文的dsRNA等。RNAi的作用現(xiàn)象很普遍,要有以下三個階段。不同來源的雙鏈RNA被RNA核酸酶與雙小為21~23個堿基對的小RNA片段(siR有3'羥基末端和5'磷酸基團的雙鏈形式,在
圖1.2RNAi的效應階段Fig1.2EffectphaseofRNAi
圖1.1RNAi的啟動階段Fig1.1InitiationphaseofRNAi初始階段,由RNA核酸酶裂解產生的siR解鏈。然后,在siRNA反義鏈的指導下,地切割RNA,導致RNA降解,從而達到抑
圖1.3RNAi的擴增階段
圖1.3RNAi的擴增階段Fig1.3AmplificationphaseofRNAi分廣泛,在眾多領域有著重要應用。主要包療領域中的應用、在整形外科領域的應用前的治療、腫瘤病的治療、在植物學中的應酶酶(GST)主要分布在胞漿中,在線粒體、23-29KDa之....
圖2.1雞胚原代肝實質細胞
d胚齡的雞胚五枚,按2.3.1中方法分離培養(yǎng)雞胚原代肝實分裝于6孔板中,將其置于溫度為37℃、二氧化碳濃度為養(yǎng)。正常換液,分別于24、48、72、96h后觀察其細胞生代細胞培養(yǎng)結果和培養(yǎng)的過程中,由于肝臟的無定形物質比較多,培養(yǎng)過免沉積從而影響細胞形態(tài)。分離....
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