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香茅草單萜合成酶基因的克

發(fā)布時間:2023-03-13 21:00
  植物資源的綜合應用是目前的研究熱點,開發(fā)具有經(jīng)濟價值的植物源產(chǎn)品在現(xiàn)在市場上尤為迫切。大多數(shù)植物的次生代謝產(chǎn)物主要有萜類、生物堿、苯丙烷類等,植物次生代謝產(chǎn)物對植物本身和人類有著極其重要作用。對于植物,產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物是面對惡劣環(huán)境下保護自身的手段;而對于我們人類而言,很多植物次生代謝產(chǎn)物具有治療疾病的重要功效,也是醫(yī)藥品和化妝品的重要來源。其中,萜類化合物是植物次生代謝產(chǎn)物中最多樣化的天然代謝產(chǎn)物,具有重要的藥理作用和廣泛的生物學功能。因而,闡明萜類化合物在植物中的生物合成途徑,研究其分子調控機制有著重要的意義。香茅(Cymbopogon citratus)具有栽培容易、易于管理、投資小、見效快等優(yōu)點,易于發(fā)展大規(guī)模種植。其莖葉提取的精油在食物、防腐、醫(yī)藥等領域有著廣泛的應用。有研究證實,香茅草精油中主要成分為萜類化合物,其藥理作用主要包括抗菌、消炎、止痛、抗氧化、抑制腫瘤、抗焦慮、降低血糖及降壓等。以往對香茅草的研究主要集中在其精油的提取和成分分析,對其重要化合物的生物合成及代謝調控的研究相對較少,基因組中大多數(shù)基因的功能仍不清楚,因此無法調控其特有的合成途徑從而大幅度提高其產(chǎn)物的...

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 香茅草研究概述
    1.3 萜類化合物及其功能
        1.3.1 萜類化合物
        1.3.2 萜類化合物的功能
    1.4 .萜類生物合成途徑
    1.5 萜類合成酶的研究概況
        1.5.1 萜類合成酶的結構與功能
        1.5.2 萜類合成酶的進化和分類
        1.5.3 萜類合成酶基因的克隆及研究進展
    1.6 課題研究內容、研究目的及意義
        1.6.1 主要研究內容
        1.6.2 研究目的及意義
第二章 材料與方法
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要試劑及器材
        2.2.3 質粒與菌株:
    2.3 香茅草單萜合成酶基因的克隆
        2.3.1 .香茅草總RNA的提取
        2.3.2 RNA質量檢測
        2.3.3 cDNA文庫構建—RNA反轉錄
        2.3.4 引物設計
        2.3.5 目的基因片段的獲取
        2.3.6 蛋白的親疏水性分析[69-70]
    2.4 原核表達體系的建立和優(yōu)化
        2.4.1 原核表達載體構建
        2.4.2 表達載體和目的基因的連接
        2.4.3 目的蛋白的原核表達
        2.4.4 聚丙烯凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測
    2.5 表達蛋白的純化
        2.5.1 蛋白的提取與純化
第三章 結果與分析
    3.1 .總RNA電泳檢測結果
    3.2 目的片段獲取與鑒定
    3.3 編碼蛋白的親疏水性分析
    3.4 目的蛋白的SDS-PAGE檢測結果
    3.5 蛋白純化SDS-PAGE檢測
    3.6 本章小結
第四章 總結與展望
    4.1 總結
    4.2 展望
參考文獻
致謝



本文編號:3762381

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