目的利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)誘導(dǎo)C57BL/6J小鼠神經(jīng)管畸形(neural tube defects,NTDs),觀察5-FU對(duì)NTDs胎鼠腦組織基因表達(dá)的影響。方法采用無(wú)特定病原體(specific pathogen free,SPF)級(jí)C57BL/6J小鼠,孕鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。在孕7.5 d時(shí),實(shí)驗(yàn)組孕鼠腹腔注射12.5 mg/kg的5-FU(葉酸相關(guān)代謝通路中關(guān)鍵酶胸苷酸合成酶抑制劑);對(duì)照組孕鼠腹腔注射等體積的生理鹽水。孕13.5 d時(shí)通過(guò)體視顯微鏡及HE染色觀察胎鼠畸形及神經(jīng)管發(fā)育情況。在此基礎(chǔ)上利用表達(dá)譜芯片分析NTDs胎鼠腦組織中基因表達(dá)的變化,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)行驗(yàn)證。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用t檢驗(yàn)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組小鼠NTDs的發(fā)生率為42.3%(22/52),主要為露腦畸形;對(duì)照組無(wú)一例NTDs。HE染色可見(jiàn)NTDs胎鼠的端腦和后腦結(jié)構(gòu)紊亂。表達(dá)譜芯片篩選出差異表達(dá)基因137個(gè),其中表達(dá)上調(diào)的基因40個(gè),表達(dá)下調(diào)的基因97個(gè),這些基因主要參與了多器官發(fā)育、細(xì)胞增殖及分化等生物過(guò)程以及與腦部發(fā)育相關(guān)的重要通路。選擇表達(dá)差異明顯且與胚...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動(dòng)物模型的建立
    1.2 表達(dá)譜芯片檢測(cè)
    1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 5-FU誘導(dǎo)小鼠NTDs的結(jié)果
    2.2 HE染色結(jié)果
    2.3 5-FU對(duì)小鼠胚胎腦組織基因表達(dá)的影響
3 討論



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