植物己糖激酶是雙功能蛋白,具有磷酸化己糖和介導(dǎo)糖信號(hào)的關(guān)鍵性作用。前期研究中,我們從茶樹中克隆獲得4個(gè)己糖激酶基因,其中CsHXK2基因編碼492個(gè)氨基酸殘基,與擬南芥AtHXK3、番茄LeHXK4歸為Type A類HXKs。利用RT-PCR技術(shù),克隆獲得長(zhǎng)度為2029bp的CsHXK2基因啟動(dòng)子。CsHXK2基因可能受到光照、低溫、病原菌、糖和多種激素等信號(hào)的調(diào)控,且可能特異性表達(dá)于葉、花、種子、根系、腋芽等組織。CsHXK2蛋白定位于葉綠體內(nèi)。酵母突變體功能互補(bǔ)試驗(yàn)表明,去除葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)信號(hào)肽的CsHXK2成熟蛋白具有葡萄糖和果糖磷酸化活性。茶樹組織特異性表達(dá)分析顯示,CsHXK2基因在根和莖中表達(dá)量最高,而在老葉中表達(dá)量最低。CsHXK2基因的表達(dá)受低溫脅迫而顯著下調(diào),經(jīng)炭疽菌侵染的茶樹葉片內(nèi)CsHXK2基因的表達(dá)也受到顯著抑制,而外源赤霉素（GA₃）處理的茶樹葉片內(nèi)CsHXK2基因表達(dá)顯著上調(diào)。本研究結(jié)果表明,CsHXK2基因在茶樹的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程和逆境脅迫響應(yīng)中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 基因組DNA、總RNA的提取及cDNA的合成
    1.3 CsHXK2基因啟動(dòng)子克隆及生物信息學(xué)分析
    1.4 CsHXK2基因系列載體構(gòu)建
    1.5 CsHXK2蛋白亞細(xì)胞定位
    1.6 CsHXK2蛋白酵母功能互補(bǔ)驗(yàn)證
    1.7 CsHXK2基因表達(dá)分析
    1.8 數(shù)據(jù)獲取、處理及分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 CsHXK2基因啟動(dòng)子克隆及分析
    2.2 CsHXK2蛋白亞細(xì)胞定位
    2.3 CsHXK2蛋白酵母功能互補(bǔ)驗(yàn)證
    2.4 CsHXK2基因組織表達(dá)特異性
    2.5 CsHXK2基因不同處理下的表達(dá)模式
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]茶鮮葉可溶性糖和氨基酸含量與低溫的相關(guān)性[J]. 田野,王夢(mèng)馨,王金和,韓寶瑜.  茶葉科學(xué). 2015(06)



本文編號(hào)：3695207