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利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)構(gòu)建TERC基因敲除大鼠及初步研究

發(fā)布時間:2022-10-04 15:04
  研究背景與目的端粒(Telomeres)由富含鳥嘌呤(G)的重復(fù)序列組成,并與一種稱為端粒蛋白復(fù)合體(Shelterin)的保護(hù)性蛋白復(fù)合物結(jié)合,定位于真核生物染色體的末端,以保護(hù)真核生物染色體的線性末端不被降解和融合,從而起到保護(hù)染色體基因組穩(wěn)定性的作用。端粒酶(Telomerase)是一種核糖核酸聚合酶,在端粒合成中起著關(guān)鍵作用。端粒酶在染色體末端添加重復(fù)端粒,以彌補DNA復(fù)制過程中端粒序列的丟失。端粒酶除了是調(diào)節(jié)衰老的關(guān)鍵因子外,其也與癌癥發(fā)生發(fā)展等眾多生物學(xué)過程密切相關(guān)。端粒酶全酶由蛋白質(zhì)催化亞基TERT和RNA亞基TERC組成。端粒酶RNA組件(Telomerase RNA component,TERC)作為端粒酶全酶的非編碼RNA模板和基礎(chǔ)骨架,對調(diào)節(jié)端粒酶活性和端粒酶全酶的組裝具有重要意義。經(jīng)過幾十年的研究,人們對TERC基因結(jié)構(gòu)和功能的認(rèn)識逐漸加深,目前TERC基因被確認(rèn)為長鏈非編碼RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)的一員,TERC基因除充當(dāng)端粒酶模板外,TERC還發(fā)揮著與端粒酶無關(guān)的其它一些重要的生物學(xué)功能。因此,為深入研究TERC基因生物學(xué)... 

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 Cas9 mRNA與sgRNAs制備
    一. 材料和方法
    二. 結(jié)果
    三. 小結(jié)
第二章 利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)制備TERC基因敲除大鼠
    一. 材料和方法
    二. 結(jié)果
    三. 小結(jié)
第三章 TERC基因敲除大鼠生物學(xué)特性分析
    一. 材料及方法
    二. 結(jié)果
    三、小結(jié)和討論
全文討論
References
攻讀碩士期間主要成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
博士論文
[1]利用CRISPR/Cas9進(jìn)行基因編輯[D]. 沈彬.南京大學(xué) 2014



本文編號:3685251

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