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nicastrin基因沉默的HaCaT細胞基因表達譜分析

發(fā)布時間:2022-09-21 17:40
  目的通過沉默人永生化角質形成細胞HaCaT細胞中nicastrin(NCSTN)基因的表達,研究其下游細胞增殖及分化相關信號通路的改變。方法將HaCaT細胞分為干擾組、陰性對照組和空白對照組:干擾組轉染特異性NCSTN-siRNA,陰性對照組轉染陰性對照siRNA,空白對照組轉染等量轉染試劑。實時PCR及Western印跡檢測各組NCSTN mRNA和蛋白表達驗證轉染效率。運用Agilent人類全基因組表達譜芯片技術研究干擾組HaCaT細胞基因表達譜與陰性對照組之間的差異,以表達上調或者下調倍數(shù)≥ 2.0且P ≤ 0.05為標準,將差異基因用GO分析進行富集,篩選出表達差異顯著且與角質形成細胞增生分化相關的基因,用實時PCR驗證結果。結果干擾組HaCaT細胞NCSTN mRNA及蛋白相對表達量分別為0.287 ± 0.090、0.443 ± 0.085,明顯低于陰性對照組(0.969 ± 0.127、1.047 ± 0.114)以及空白對照組(1.000 ± 0.151、1.000 ± 0.111),差異均有統(tǒng)計學意義(F值分別為30.787、31.139,P值均為0.001)。表達譜... 

【文章頁數(shù)】:7 頁

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Nicastrin基因突變的反常性痤瘡患者皮損Notch-HES信號通路的表達[J]. 肖學敏,李誠讓,何艷艷,張曉峰,徐浩翔,王寶璽.  中華皮膚科雜志. 2016 (06)



本文編號:3680381

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