長爪沙鼠作為一種待開發(fā)的―多功能‖實驗動物,具有廣泛應(yīng)用前景。國內(nèi)外學(xué)者利用長爪沙鼠特殊的生物特性建立了多種人類疾病動物模型。為了研究諸多疾病的發(fā)生、發(fā)展、治療和轉(zhuǎn)歸機制需要各種實驗動物模型,但目前長爪沙鼠尚未建立轉(zhuǎn)基因及基因敲除/敲減等動物模型。本實驗利用一種新型的應(yīng)用廣泛的方便快捷的方法—CRISPR/Cas9技術(shù)在長爪沙鼠上進行轉(zhuǎn)基因方法探索,為長爪沙鼠動物模型研究和相關(guān)基因功能奠定技術(shù)基礎(chǔ)。原核生物中CRISPR-Cas編碼的是一種適應(yīng)性免疫系統(tǒng)用來抵御感染的病毒和質(zhì)粒。免疫是由Cas核酸,通過小型RNA介導(dǎo)（crRNAs）其酶切入侵的核酸的基因組內(nèi)特定酶切解位點。在II型CRISPR-Cas系統(tǒng)中,DNA切割活性通過由RNA引導(dǎo)單一酶Cas9進行。使用合成單個引導(dǎo)RNA（gRNA）,Cas9可以重新編程中的各種生物的基因組以創(chuàng)建特定雙鏈DNA斷裂,幾乎在所以實驗動物中,都可以構(gòu)成用于遺傳工程的有力工具。動物克隆和轉(zhuǎn)基因等胚胎生物技術(shù)需要超數(shù)排卵提供足夠數(shù)量的卵與胚胎,因此超數(shù)排卵對動物胚胎生物技術(shù)研究具有重要意義。為了得到長爪沙鼠最佳的超數(shù)排卵方案,我們通過對長爪沙鼠使用時周... 

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 PMSG和hCG誘導(dǎo)的長爪沙鼠超數(shù)排卵方案的優(yōu)化
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 gRNA的設(shè)計及篩選
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分 長爪沙鼠CRISPR/Cas9基因敲除方法的初步建立
    實驗材料
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
文獻綜述
參考文獻
攻讀學(xué)位期間文章發(fā)表情況
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3656969