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金銀花蛀干害蟲咖啡脊虎天牛嗅覺相關基因鑒定及表達譜分析

發(fā)布時間:2022-02-26 14:26
  金銀花Lonicera japonicaThunb為忍冬科Caprifoliaceae多年生常綠藤本植物,其花是我國傳統(tǒng)常用中藥?Х燃够⑻炫#╔ylotrechus grayii White)是金銀花的蛀干害蟲,隱蔽危害,利用化學農(nóng)藥對其防治效果不明顯且嚴重影響藥材安全性,急需開發(fā)無公害的防治手段。在長期進化過程中,昆蟲形成高度靈敏和復雜的嗅覺系統(tǒng),用其感受并識別外界環(huán)境中的化學信息物質(zhì),完成寄主植物、配偶的搜尋和定位。昆蟲嗅覺信號的形成涉及氣味結(jié)合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)和化學感受蛋白(chemosensory protein,CSPs)等一系列相關蛋白的互作,闡明昆蟲對環(huán)境中揮發(fā)性化合物的感受機制,為利用化學信息素對害蟲進行迷向、引誘等可持續(xù)控制提供理論依據(jù)。本文通過測定咖啡脊虎天牛成蟲觸角轉(zhuǎn)錄組,利用生物信息學方法鑒定嗅覺相關蛋白基因,并分析化學感受蛋白基因CSPs在不同組織的表達差異,初步揭示咖啡脊虎天牛的嗅覺感受機制,為該天?茖W防治提供理論依據(jù)。主要取得如下研究結(jié)果:1、咖啡脊虎天牛觸角轉(zhuǎn)錄組測序及生物信息學分析:(1)咖啡脊虎天... 

【文章來源】:貴州師范大學貴州省

【文章頁數(shù)】:73 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 文獻綜述
    1.1 金銀花藥用價值
    1.2 金銀花常見害蟲
    1.3 咖啡脊虎天牛研究現(xiàn)狀
        1.3.1 形態(tài)特征
        1.3.2 生物學習性
        1.3.3 危害及發(fā)生規(guī)律
        1.3.4 防治措施
    1.4 昆蟲嗅覺感受機制
        1.4.1 昆蟲嗅覺感器
        1.4.2 昆蟲對信息化學物質(zhì)的識別
    1.5 嗅覺相關蛋白研究概況
        1.5.1 昆蟲氣味結(jié)合蛋白研究進展
        1.5.2 昆蟲化學感受蛋白研究進展
        1.5.3 昆蟲氣味受體研究進展
        1.5.4 昆蟲感覺神經(jīng)元膜蛋白研究進展
    1.6 研究目的與意義
    1.7 研究內(nèi)容
    1.8 技術路線
2 咖啡脊虎天牛觸角轉(zhuǎn)錄組分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試昆蟲
        2.1.2 實驗儀器與試劑
        2.1.3 咖啡脊虎天牛總RNA的提取
    2.2 轉(zhuǎn)錄組測序
    2.3 生物信息分析流程
        2.3.1 測序數(shù)據(jù)過濾
        2.3.2 Unigene的功能注釋
    2.4 結(jié)果與分析
        2.4.1 咖啡脊虎天?俁NA提取質(zhì)量
        2.4.2 測序及組裝結(jié)果
        2.4.3 Unigene功能注釋與KOG分類
        2.4.4 Nr注釋
        2.4.5 GO注釋
        2.4.6 KOG注釋
        2.4.7 KEGG注釋
    2.5 討論
3 咖啡脊虎天牛嗅覺相關基因鑒定
    3.1 實驗方法
        3.1.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關基因鑒定
        3.1.2 OBP基因鑒定
        3.1.3 CSP基因鑒定
        3.1.4 ORs、SNMPs基因鑒定
    3.2 序列分析
    3.3 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關蛋白序列分析
        3.4.2 構(gòu)建咖啡脊虎天牛嗅覺相關蛋白系統(tǒng)發(fā)育樹
    3.5 討論
4 咖啡脊虎天;瘜W感受基因組織表達模式研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 總RNA提取
        4.1.5 cDNA第一鏈合成
        4.1.6 qRT-PCR引物設計
        4.1.7 實時熒光定量PCR(qRT-PCR)反應
    4.2 結(jié)果分析
        4.2.1 qRT-PCR結(jié)果
    4.3 討論
5 結(jié)論與展望
參考文獻
攻讀碩士研究生期間發(fā)表的學術論文
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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[3]中黑盲蝽嗅覺相關蛋白鑒定及非典型嗅覺受體基因分析[D]. 崔歡歡.中國農(nóng)業(yè)科學院 2016
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[8]金銀花中兩種除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留動態(tài)研究[D]. 劉璐.北京協(xié)和醫(yī)學院 2015
[9]黃曲條跳甲化學感受基因的鑒定與表達分析[D]. 王正兵.仲愷農(nóng)業(yè)工程學院 2015
[10]云斑天牛性信息素分離鑒定及氣味結(jié)合蛋白結(jié)合特性分析[D]. 潘翔宇.華中農(nóng)業(yè)大學 2014



本文編號:3644657

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