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池蝶蚌性別相關(guān)基因Tra2β的克隆和表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2022-02-23 05:48
  研究首次從池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)中克隆到Transformer 2β基因(以下簡稱:Hs-Tra2β),在 NCBI GeneBANK 上的基因登錄號為 MK991900,其 ORF(Open reading frame)框長53 1bp,編碼176個(gè)氨基酸,同源比對顯示Hs-Tra2β蛋白含有典型的RRM結(jié)構(gòu)域,構(gòu)建進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)其與太平洋牡蠣Tra2β蛋白聚為一支,說明其基因進(jìn)化較高保守。利用qRT-PCR檢測了Hs-Tra2β mRNA在池蝶蚌不同組織的表達(dá)情況:其mRNA在性腺、肝胰腺和腸中表達(dá)較高,說明Hs-Tra2β可能參與了調(diào)控池蝶蚌性別分化。檢測Hs-Tra2β的年齡差異性表達(dá):Hs-Tra2βmRNA在卵巢中從1-5齡表達(dá)持續(xù)上調(diào),在5齡卵巢中表達(dá)量達(dá)到最高。在精巢中Hs-Tra2βmRNA表達(dá)從1-3齡上調(diào),3齡時(shí)表達(dá)量最高,3-5齡回落。為進(jìn)一步研究Hs-Tra2β mRNA表達(dá)是否受溫度變化影響及其表達(dá)分子調(diào)控機(jī)制,qRT-PCR同時(shí)檢測不同溫度下Hs-Tra2β和Hs-Tra2α及下游受其潛在調(diào)控的Hs-Fem1b和Hs-Fem1c的m... 

【文章來源】:南昌大學(xué)江西省211工程院校

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

池蝶蚌性別相關(guān)基因Tra2β的克隆和表達(dá)分析


黑腹果蠅性別控制機(jī)制(引自文獻(xiàn)[23])

模式圖,性別分化,線蟲,模式


第一章綜述4(transformer-2),fem-1(transformer-1),fem-2(feminization-2),fem-3(feminization-3),Cul-2(Cullin-2)調(diào)控tra-1(transformer-1)[96]。TRA-1蛋白是促進(jìn)個(gè)體向雌性發(fā)展的調(diào)控途徑的末端因子[51][52]。X/A(每套常染色體的X染色體數(shù))比率決定了線蟲中的兩種染色體類型:XX和XO[53][54]。低的X/A比激活了her-1基因的轉(zhuǎn)錄,該基因是TRA-2蛋白的抑制性配體。不受TRA-2蛋白的影響,由Fem-1/2/3和CUL-2蛋白形成的復(fù)合物靶向下游轉(zhuǎn)錄因子TRA-1進(jìn)行降解,因此這些個(gè)體將發(fā)育為雄性。相反,較高的X/A比會(huì)抑制her-1基因的轉(zhuǎn)錄,使TRA-2蛋白處于活性形式,該蛋白可以與FEM-1/2/3和CUL-2結(jié)合以調(diào)節(jié)TRA-1的表達(dá)蛋白。在這種情況下,有機(jī)體將發(fā)展為雌雄同體的動(dòng)物[55]][56][57]。Tra2基因和Fem基因表達(dá)表現(xiàn)為相互抑制,兩者為上下游關(guān)系[58](圖1.2)。圖1.2線蟲性別分化決定模式(引自文獻(xiàn)[58])Figure1.2SexdifferentiationmodelinCaenorhabditiselegans

依賴性,性別分化,溫度,線蟲


第一章綜述6圖1.3擬議的溫度依賴性表觀遺傳調(diào)控。(引自文獻(xiàn)[72])Figure1.3Proposedtemperature-dependentepigeneticregulation淡水貝類在進(jìn)化地位以及生態(tài)系統(tǒng)中占有重要地位,已知其性別分化易受環(huán)境影響,而影響其性別分化的關(guān)鍵環(huán)境因子以及相關(guān)聯(lián)基因的表達(dá)調(diào)控機(jī)制仍無系統(tǒng)研究,比如溫度對其性別分化及性別分化相關(guān)聯(lián)基因的表達(dá)調(diào)控是否有影響?1.5本研究的意義本課題組已相繼開展了對池蝶蚌(Hyriopsisschlegelii)多方面的選育工作[73][74][75],前期研究發(fā)現(xiàn),池蝶蚌在1齡時(shí)出現(xiàn)原始生殖系統(tǒng),而在2齡和3齡過程中可以同時(shí)觀察到卵巢和精巢的初期形態(tài),可當(dāng)性別完全形成時(shí),4齡5齡時(shí),個(gè)體則是以單性性別存在[74],池蝶蚌中這種特殊的性別分化的方式表明,在其性別分化過程中,性別決定的影響機(jī)制可能存在類似于線蟲和果蠅中。推測池蝶蚌的Fem1b(Feminizing1b)、Fem1c基因功能類似于線蟲會(huì)參與雄性性別分化[23],而Fem1a類似于秀麗隱桿線蟲中則被認(rèn)為對性別分化幾乎沒有作用,為了證實(shí)以上推測。本研究在基于前期研究表明池蝶蚌Tra2α與性別分化有重要作用的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步從池蝶蚌性腺轉(zhuǎn)錄組中篩選到一條疑似Tra2的另一個(gè)亞型Tra2β同源序

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]池蝶蚌性別決定相關(guān)基因feminization-1基因的分子特征及表達(dá)分析[D]. 熊文芳.南昌大學(xué) 2014
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[4]溫度影響中國林蛙性別決定分子機(jī)制研究[D]. 王本耀.華東師范大學(xué) 2012
[5]池蝶蚌性腺發(fā)育的觀察[D]. 王濱花.南昌大學(xué) 2010
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本文編號:3640997

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