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擬南芥親免蛋白CYP26-2功能初探及一個糖敏感型突變體基因定位與表型鑒定

發(fā)布時間:2022-01-24 13:55
  親免蛋白(Immunophilins)是最初在動物體內發(fā)現的免疫抑制藥物在細胞內的受體,根據其結合的配體的不同主要分為CYPs(cyclophilins,CYPs)和FKBPs(FK-506 binding proteins,FKBPs)兩大家族。親免蛋白廣泛存在各個生物體中,包括細菌、真菌、動物和植物。研究表明,親免蛋白在植物中的數量最多。擬南芥基因組總共編碼了52個親免蛋白,其中有17個定位于葉綠體中,這表明葉綠體是包含親免蛋白最多的細胞器。據文獻報道,擬南芥葉綠體中的17個親免蛋白中只有一個存在于基質中,其余的16個均定位于類囊體腔中。類囊體膜是綠色植物光合大分子組裝的場所,那么數量最多的親免蛋白是否也參與了光合大分子的形成呢。已有報道擬南芥類囊體腔中的一個親免蛋白CYP38對PSII的正確組裝及穩(wěn)定性維持具有重要的作用,此項研究為親免蛋白參與光合作用供了依據。CYP26-2也是類囊體腔中的親免蛋白之一,分子量大小為26KD,那么該蛋白是否也參與了光合作用的過程,目前對于這方面還沒有確切的研究。本文主要對CYP26-2是否參與了光合作用的基本過程這一核心問題進行初步的探究。首先使... 

【文章來源】:西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數】:100 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

擬南芥親免蛋白CYP26-2功能初探及一個糖敏感型突變體基因定位與表型鑒定


活性膠分離CYP26-2-HA植株葉片的類囊體膜

分析圖,蔗糖密度梯度離心,類囊體膜,植株葉片


第二章 CYP26-2 功能的初探分析圖 2.2 的結果,1-18 號樣品中都可檢測到 CYP26-2 的信號,但是他們的信號強度是不同的。其中信號最強的是 3、4、5、6 四個樣品, 根據他們在活性膠中的對應位置,將 3 和 4、5 和 6 混和成兩個新的樣品,分別標記為 a 和 b。13、14、15 三個樣品的信號相對較強,這三個樣品對應于活性膠上 PSⅡ的位置,所以將其混合標記為樣品 c。對于其他的 1-18 之間的樣品中檢測到的較弱的CYP26-2 的信號,我們認為有可能是取樣過程中造成的污染。這部分的實驗結果也能從一定程度反應出 CYP26-2 有可能參與了光合作用的過程。

活性膠


圖 2.3 三種混合樣品活性膠及 Western Blotting 分析。A.三種混合樣品活性膠分析 B.活性膠 CYP26-2 蛋白的 Western Blotting 分析。Fig. 2.3 The analysis of three mixture samples by Blue Native PAGE and Western Blotting.A. The analysis of three mixture samples by Blue Native PAGE. B. he analysis of CYP26-2protein in Blue Native gel by Western Blotting.2.4 小結本章中我們使用藍色活性膠技術及蔗糖密度梯度離心技術分離 CYP26-2-HA 過表達轉基因植株葉片的類囊體,通過 Western Blotting 檢測 CYP26-2 在兩種方法分離結果中的對應位置,以此來探究 CYP26-2 是否參與的光合大分子的組裝。藍色活性膠的 WesternBlotting 檢測的結果表明部分 CYP26-2 的信號存在A B

【參考文獻】:
期刊論文
[1]Application of CRISPR/Cas9 in plant biology[J]. Xuan Liu,Surui Wu,Jiao Xu,Chun Sui,Jianhe Wei.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2017(03)



本文編號:3606694

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