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siRNA抑制Mcl-1基因表達(dá)對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的人胃腺癌SGC7901/ADR細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-11-25 16:55
  目的 :研究沉默髓樣細(xì)胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因表達(dá)對(duì)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)誘導(dǎo)人胃腺癌耐多柔比星(adriamycin,ADR)SGC7901/ADR細(xì)胞凋亡的影響,并探討胃癌耐藥細(xì)胞株耐T RAI L凋亡效應(yīng)的可能機(jī)制。方法 :不同質(zhì)量濃度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)處理SGC7901/ADR細(xì)胞后,采用MTT法和FCM法分別檢測(cè)細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡率,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測(cè)SGC7901/ADR細(xì)胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表達(dá)水平。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將Mcl-1-si RNA轉(zhuǎn)染至SGC7901/ADR細(xì)胞,實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Mcl-1-si RNA對(duì)Mcl-1 m RNA及蛋白表達(dá)水平的影響。采用TRAIL(50 ng/m L)處理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR細(xì)胞,MTT法和FCM法分別檢測(cè)Mcl-1基因沉默后TRAIL對(duì)... 

【文章來源】:腫瘤. 2016,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:10 頁

【文章目錄】:
1材料與方法
    1.1細(xì)胞和試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 MTT法檢測(cè)TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞活力的影響
    1.4 FCM法檢測(cè)TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞凋亡的影響
    1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞中Mcl-1 m RNA表達(dá)的影響
    1.6 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞中Mcl-1 蛋白表達(dá)的影響
    1.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染及Mcl-1-si RNA沉默效果的鑒定
    1.8 檢測(cè)轉(zhuǎn)染Mcl-1-si RNA后聯(lián)合應(yīng)用TRAIL對(duì)細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)的影響
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞活力和細(xì)胞凋亡的影響
    2.2 TRAIL上調(diào)SGC7901/ADR細(xì)胞中Mcl-1m RNA和蛋白的表達(dá)
    2.3 Mcl-1-si RNA抑制SGC7901/ADR細(xì)胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表達(dá)
    2.4 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因的表達(dá)可增強(qiáng)TRAIL對(duì)SGC7901/ADR細(xì)胞增殖的抑制作用
    2.5 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因表達(dá)可促進(jìn)TRAIL誘導(dǎo)SGC7901/ADR細(xì)胞凋亡
    2.6 Mcl-1-si RNA抑制Mcl-1 表達(dá)對(duì)TRAIL誘導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]TRAIL抑制胃癌多藥耐藥基因MDR1/P-gp的表達(dá)[J]. 王慧群,張開光.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)



本文編號(hào):3518547

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