NCAGP基因?qū)εL汗趋兰碓吹某杉〖毎薪z分裂和成肌分化的影響及機理研究
發(fā)布時間:2021-11-14 12:05
肉牛的生長速度和胴體重是肉牛品種優(yōu)劣的重要標準,能夠直接影響肉牛經(jīng)濟效益,因此,培育生長速度快,出肉率高的優(yōu)質(zhì)肉牛品種是一項有重要的實際意義的工作。牛骨骼肌的發(fā)育起始于妊娠早期,骨骼肌的發(fā)育經(jīng)歷了間充質(zhì)干細胞、肌祖細胞、成肌細胞、初級肌纖維、次級肌纖維幾個階段,在多種轉(zhuǎn)錄因子的作用下,逐漸在妊娠后期發(fā)育成型。為了探索肉牛生長發(fā)育性狀重要候選基因NCAPG在牛骨骼肌發(fā)育中的機理,通過研究NCAPG在體外成肌分化模型中的作用來初步解釋其對生長性狀的作用機制。主要通過siRNA干擾NCAPG表達的手段,研究NCAPG對牛胎兒骨骼肌來源的成肌細胞有絲分裂和成肌分化的影響,并探究其作用機理。得到主要結(jié)果如下:1、用膠原酶消化法從三月齡的牛胎兒骨骼肌組織中分離成肌細胞,用馬血清培養(yǎng)基誘導分化,成肌細胞分化能力較強,誘導后大量細胞融合形成肌管,隨著分化時間的增加,MYH1、MYH2、MYH3和MYH4的表達量上調(diào),MYOD和MYF5表達下調(diào),MYOG表達量基本穩(wěn)定;2、在成肌細胞增殖時期,用siRNA干擾NCAPG表達后,成肌細胞有絲分裂的時間比陰性對照組延長了約25%;3、在成肌細胞分化階段,用s...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
凝縮蛋白的分子結(jié)構(Hirano,2012)
士學位論文 第一章一過程是非必須的。通過干擾 Condensin 的亞基表達來降低細胞中凝胞染色質(zhì)壓縮在細胞分裂前期末才開始,但是隨著核膜的崩解,染色都表明 Condensin II 和 Condensin I 對染色質(zhì)壓縮是有先后順序的,并用不同(Hirota,Gerlich,Koch,Ellenberg,Peters, 2004)。在個體發(fā)育水平上,-G2 的基因會導致胚胎致死的發(fā)生(Xu et al., 2006a;Smith et al., 2004)。胞中的 1:1 和非洲爪蛙卵細胞提取物中的 5:1 到雞 DT40 細胞中的 10:1胞中的比例有所不同。Condensin I 和 II 的相對豐度在不同類型的細胞中可能直接反映了兩類凝縮蛋白對染色體壓縮的不同功能(Ono et al., II 的比例變。◤ 5:1 到 1:1),胚胎的細胞染色體變粗變短,當去除 C 1:0 時,染色體變得更長,這一結(jié)果有力的證明了 Condensin II 負責 Condensin I 負責染色體的側(cè)向壓縮(Shintomi et al., 2011),如圖 1.2。
夠?qū)毎愋吞禺愋缘幕虮磉_起調(diào)節(jié)作用,小鼠 T 細胞的發(fā)育和靜息狀態(tài)的維持需sin II 使染色質(zhì)壓縮,CAP-H2 的突變會導致染色質(zhì)結(jié)構開放從而使 T 細胞在正常情況下因表達上調(diào)(Rawlings et al., 2011)。鼠科動物的 CAP-G2 能夠在紅細胞分化成熟的過程中,在這一過程中細胞核逐漸被壓縮(Xu et al., 2006a)。Condensin 對胚胎干細胞高度有序壓縮及其存活也是必不可少的(Fazzio et al., 2010)。酵母的 Condensin 對于間期染色質(zhì)的NA 聚合酶 III 轉(zhuǎn)錄的基因簇的轉(zhuǎn)錄起著重要作用(Iwasaki et al., 2010)。了 Condensin 調(diào)控的壓縮,組蛋白修飾也可以影響線蟲有絲分裂過程中染色質(zhì)壓縮和線償 X 染色體的結(jié)構。在有絲分裂過程的染色體上和有絲分裂間期劑量補償 X 染色體上生組蛋白 H4 第 20 位賴氨酸一甲基化(H4K20me1)的增加和第 16 位賴氨酸乙酰16ac)的減少(Wells et al., 2012;Oda et al., 2009a;Rice et al., 2002a;Vielle et al., 201s et al., 2014)。在細胞周期中,H4K20 甲基轉(zhuǎn)移酶 PR-Set7 和 H4K20me1 的水平在 G2 期高,并在有絲分裂中保持較高水平,而在 G1 期下降,干擾 PR-Set7 會導致細胞周期的致有絲分裂和間期染色體的解壓縮(Oda et al., 2009a)。這表明了 H4K20me1 對于有絲分體壓縮的重要性。H4K16ac 的水平在細胞的 S 期增加,而在有絲分裂期間水平下降,這 H4K20me1 對 H4K16ac 具有拮抗作用的發(fā)現(xiàn)相一致(Nishioka et al., 2002a)。H4K16ac 去引起H2A和H4臨近分子相互作用的增強,導致染色體更高程度的壓縮(Shogren-Knaak e
【參考文獻】:
期刊論文
[1]全基因組關聯(lián)分析在畜禽重要經(jīng)濟性狀中的研究進展[J]. 喬賢,張磊,李曉凱,范一星,馬宇浩,張燕軍,劉志紅,王瑞軍,王志英,王志新,趙艷紅,何利兵,李金泉,蘇蕊. 家畜生態(tài)學報. 2017(10)
[2]全基因組關聯(lián)分析在畜禽中的研究進展[J]. 王繼英,王海霞,遲瑞賓,郭建鳳,武英. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2013(04)
[3]siRNA分子設計研究進展[J]. 孟慶霞,徐寶林. 吉林大學學報(信息科學版). 2012(02)
博士論文
[1]牛間充質(zhì)干細胞成肌/成脂分化中差異miRNAs的鑒定及miR-23a調(diào)控機制研究[D]. 關龍.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
本文編號:3494605
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:54 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
凝縮蛋白的分子結(jié)構(Hirano,2012)
士學位論文 第一章一過程是非必須的。通過干擾 Condensin 的亞基表達來降低細胞中凝胞染色質(zhì)壓縮在細胞分裂前期末才開始,但是隨著核膜的崩解,染色都表明 Condensin II 和 Condensin I 對染色質(zhì)壓縮是有先后順序的,并用不同(Hirota,Gerlich,Koch,Ellenberg,Peters, 2004)。在個體發(fā)育水平上,-G2 的基因會導致胚胎致死的發(fā)生(Xu et al., 2006a;Smith et al., 2004)。胞中的 1:1 和非洲爪蛙卵細胞提取物中的 5:1 到雞 DT40 細胞中的 10:1胞中的比例有所不同。Condensin I 和 II 的相對豐度在不同類型的細胞中可能直接反映了兩類凝縮蛋白對染色體壓縮的不同功能(Ono et al., II 的比例變。◤ 5:1 到 1:1),胚胎的細胞染色體變粗變短,當去除 C 1:0 時,染色體變得更長,這一結(jié)果有力的證明了 Condensin II 負責 Condensin I 負責染色體的側(cè)向壓縮(Shintomi et al., 2011),如圖 1.2。
夠?qū)毎愋吞禺愋缘幕虮磉_起調(diào)節(jié)作用,小鼠 T 細胞的發(fā)育和靜息狀態(tài)的維持需sin II 使染色質(zhì)壓縮,CAP-H2 的突變會導致染色質(zhì)結(jié)構開放從而使 T 細胞在正常情況下因表達上調(diào)(Rawlings et al., 2011)。鼠科動物的 CAP-G2 能夠在紅細胞分化成熟的過程中,在這一過程中細胞核逐漸被壓縮(Xu et al., 2006a)。Condensin 對胚胎干細胞高度有序壓縮及其存活也是必不可少的(Fazzio et al., 2010)。酵母的 Condensin 對于間期染色質(zhì)的NA 聚合酶 III 轉(zhuǎn)錄的基因簇的轉(zhuǎn)錄起著重要作用(Iwasaki et al., 2010)。了 Condensin 調(diào)控的壓縮,組蛋白修飾也可以影響線蟲有絲分裂過程中染色質(zhì)壓縮和線償 X 染色體的結(jié)構。在有絲分裂過程的染色體上和有絲分裂間期劑量補償 X 染色體上生組蛋白 H4 第 20 位賴氨酸一甲基化(H4K20me1)的增加和第 16 位賴氨酸乙酰16ac)的減少(Wells et al., 2012;Oda et al., 2009a;Rice et al., 2002a;Vielle et al., 201s et al., 2014)。在細胞周期中,H4K20 甲基轉(zhuǎn)移酶 PR-Set7 和 H4K20me1 的水平在 G2 期高,并在有絲分裂中保持較高水平,而在 G1 期下降,干擾 PR-Set7 會導致細胞周期的致有絲分裂和間期染色體的解壓縮(Oda et al., 2009a)。這表明了 H4K20me1 對于有絲分體壓縮的重要性。H4K16ac 的水平在細胞的 S 期增加,而在有絲分裂期間水平下降,這 H4K20me1 對 H4K16ac 具有拮抗作用的發(fā)現(xiàn)相一致(Nishioka et al., 2002a)。H4K16ac 去引起H2A和H4臨近分子相互作用的增強,導致染色體更高程度的壓縮(Shogren-Knaak e
【參考文獻】:
期刊論文
[1]全基因組關聯(lián)分析在畜禽重要經(jīng)濟性狀中的研究進展[J]. 喬賢,張磊,李曉凱,范一星,馬宇浩,張燕軍,劉志紅,王瑞軍,王志英,王志新,趙艷紅,何利兵,李金泉,蘇蕊. 家畜生態(tài)學報. 2017(10)
[2]全基因組關聯(lián)分析在畜禽中的研究進展[J]. 王繼英,王海霞,遲瑞賓,郭建鳳,武英. 中國農(nóng)業(yè)科學. 2013(04)
[3]siRNA分子設計研究進展[J]. 孟慶霞,徐寶林. 吉林大學學報(信息科學版). 2012(02)
博士論文
[1]牛間充質(zhì)干細胞成肌/成脂分化中差異miRNAs的鑒定及miR-23a調(diào)控機制研究[D]. 關龍.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
本文編號:3494605
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