發(fā)布時間：2021-10-01 06:01

　　目的:通過研究SAE2基因過表達和SAE2基因干擾表達的膽管癌細胞株的細胞增殖活性、細胞凋亡、細胞侵襲力的改變,探究SAE2基因?qū)δ懝馨┘毎掀らg質(zhì)化（EMT）的影響。方法:應用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法,通過轉(zhuǎn)染膽管癌系細胞,將SAE2基因重組真核表達質(zhì)粒,建立穩(wěn)定表達的SAE2基因細胞株。將其分為以下3組:SAE2過表達組,敲減SAE2組和空質(zhì)粒組。RT-PCR及Western blot法可以通過追蹤熒光來判斷SAE2mRNA水平及蛋白水平的變化;各組細胞增殖MTT和流式細胞儀檢測前顏色的實驗后（FCM）檢測各組細胞凋亡;Transwell細胞體外侵襲力實驗檢測腫瘤細胞入侵的變化。結(jié)果:RT-PCR檢測和WB檢測結(jié)果顯示,SAE2過表達組細胞中,SAE2 m RNA和蛋白表達高于敲減SAE2組,SAE2 mRNA和蛋白表達高于空質(zhì)粒組,兩組比較差異均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。敲減SAE2組細胞中,SAE2 mRNA和蛋白表達低于空質(zhì)粒組,兩組比較差異均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。MTT比色實驗測定結(jié)果顯示,各組細胞在1d時,MTT OD值兩組比較差異沒有統(tǒng)計學意義（P>... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組細胞SAE2mRNA及蛋白表達比較

青島大學碩士學位論文（P＞0.05），2d 時，SAE2 過表達組細胞 MTT OD 值高于敲減 S.580, P=0.002），高于空質(zhì)粒組（t=2.493, P=0.037），敲減 SAE2 組 OD 比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），3d 時，SAE2 過表達組細胞 M敲減 SAE2 組（t=5.349, P=0.001），高于空質(zhì)粒組（t=3.008, P=0.017）胞 MTT OD 值高于敲減 SAE2 組（t=2.327, P=0.048），差異具有統(tǒng)見表 2，圖 2。表 2 各組細胞增殖活性比較（OD）組別 1d 2d 3dAE2 過表達組 0.33±0.08 0.58±0.10*#0.78±0.1敲減 SAE2 組 0.31±0.08 0.33±0.07 0.44±0.空質(zhì)粒組 0.33±0.07 0.43±0.09 0.58±0.注：與敲減 SAE2 組比較，*P＜0.05；與空質(zhì)粒組比較，#P＜0.05

第二章 實驗結(jié)果計數(shù)的百分比低于敲減 SAE2 組（t=2.642, P=0.030），差異具有統(tǒng)計學意表 3，圖 3。表 3 各組細胞凋亡情況比較（%）組別 1d 2d 3dSAE2 過表達組 5.13±0.92 9.62±1.73*#10.87±2.06敲減 SAE2 組 5.17±0.98 13.67±2.13 17.78±2.17空質(zhì)粒組 5.16±0.89 12.93±2.18 14.38±1.89注：與敲減 SAE2 組比較，*P＜0.05；與空質(zhì)粒組比較，#P＜0.05

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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