DYRK1B基因?qū)κ彻荀[癌細(xì)胞放射敏感性影響的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-26 08:49
[目的]探討DYRK1B對(duì)食管鱗癌放射敏感性的影響及潛在機(jī)制,為提高食管鱗癌患者放射敏感性提供理論依據(jù)。[方法]用脂質(zhì)體Lipofectamine 3000分別包裹siNC、siDYRK1B轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞ECA109,48小時(shí)后收集細(xì)胞RT-PCR和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ECA109細(xì)胞中DYRK1B表達(dá)水平。同時(shí)取轉(zhuǎn)染siNC、siDYRK1B的ECA109細(xì)胞給予放射處理,用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)經(jīng)不同劑量放射處理后的細(xì)胞存活情況并計(jì)算放射增敏比;用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)4Gy照射后細(xì)胞凋亡率;用蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白cleaved PARP-1、cleaved caspase-3及DNA損傷相關(guān)蛋白γ-H2AX表達(dá)水平。[結(jié)果]轉(zhuǎn)染siDYRK1B的ECA109細(xì)胞中DYRK1B mRNA和蛋白水平明顯下降(P<0.05)。與對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染siDYRK1B的ECA109細(xì)胞放射處理后細(xì)胞存活減少,細(xì)胞凋亡率增加(P<0.05),細(xì)胞中cleaved PARP-1、cleaved caspase-3、γ-H2AX蛋白表達(dá)水平升高(P<0.05)。siDYRK1B轉(zhuǎn)染的ECA...
【文章來(lái)源】:中國(guó)腫瘤. 2020,29(08)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞與試劑
1.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.3 RT-PCR
1.4 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
1.5 克隆形成實(shí)驗(yàn)
1.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 si DYRK1B轉(zhuǎn)染ECA109細(xì)胞干擾效率檢測(cè)
2.2 DYRK1B增加ECA109細(xì)胞放射敏感性
2.3 下調(diào)DYRK1B增加放射誘導(dǎo)的ECA109細(xì)胞凋亡
2.4 下調(diào)DYRK1B增加放射處理后ECA109細(xì)胞中凋亡及DNA損傷相關(guān)蛋白表達(dá)水平
3 討論
本文編號(hào):3363935
【文章來(lái)源】:中國(guó)腫瘤. 2020,29(08)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 細(xì)胞與試劑
1.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.3 RT-PCR
1.4 蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
1.5 克隆形成實(shí)驗(yàn)
1.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 si DYRK1B轉(zhuǎn)染ECA109細(xì)胞干擾效率檢測(cè)
2.2 DYRK1B增加ECA109細(xì)胞放射敏感性
2.3 下調(diào)DYRK1B增加放射誘導(dǎo)的ECA109細(xì)胞凋亡
2.4 下調(diào)DYRK1B增加放射處理后ECA109細(xì)胞中凋亡及DNA損傷相關(guān)蛋白表達(dá)水平
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