miR-656-3p靶向ATP10A基因調控阿爾茨海默病模型細胞凋亡的分子機制
發(fā)布時間：2021-07-25 19:47
目的探究微小RNA-656-3p（miR-656-3p）對阿爾茨海默病（AD）模型細胞增殖、凋亡的影響及潛在作用機制。方法通過不同濃度淀粉樣蛋白（Aβ25～35）（0、5、10、20μmol/L）作用于SH-SY5Y細胞,選取最優(yōu)濃度構建AD模型細胞。熒光定量聚合酶鏈反應（qPCR）檢測不同濃度Aβ25～35和作用時間對miR-656-3p表達量的影響,噻唑藍（MTT）檢測模型細胞的增殖,流式細胞術檢測細胞凋亡,觀察過表達miR-656-3p或敲低腺苷三磷酸酶（ATP）10A對細胞增殖、凋亡的影響;在線軟件TargetScan預測和雙熒光素酶報告基因驗證miR-656-3p與ATP10A的靶向關系;蛋白質印跡（Western印跡）分析過表達或敲低miR-656-3p對ATP10A蛋白表達量的影響,共轉染過表達miR-656-3p和ATP10A或敲低miR-656-3p和ATP10A,觀察ATP10A對miR-656-3p調控細胞增殖、凋亡的影響。結果不同濃度Aβ25～35對SH-SY5Y細胞增殖起抑制作用（P<0.05）,且具有濃度依賴性,其中10μmol/L Aβ25～35誘導...
【文章來源】：中國老年學雜志. 2020,40(23)北大核心
【文章頁數】：6 頁
【部分圖文】：
各組細胞凋亡流式細胞檢測
表3 雙熒光素酶報告基因驗證miR-656-3p與ATP10A的靶向關系及蛋白表達 ( x ˉ ±s,n=3) 組別 ATP10A-wt ATP10A-mut ATP10A NC組 1.000±0.067 0.296±0.018 0.969±0.057 miR-656-3p組 1.000±0.081 0.998±0.0791) 0.432±0.0281) anti-NC組 1.001±0.073 3.029±0.1272) 1.000±0.062 anti-miR-656-3p組 1.003±0.068 1.000±0.056 2.629±0.1212) 1)與NC組相比,2)與anti-NC組相比,均P<0.052.4 下調ATP10A對AD模型細胞增殖、凋亡的影響
表6 下調miR-656-3p和ATP10A對阿爾茨海默病模型細胞增殖、凋亡的影響 ( x ˉ ±s,n=3) 組別 ATP10A表達量 細胞的凋亡率(%) OD490值 0 h 24 h 48 h 72 h anti-NC組 1.000±0.064 23.098±2.227 0.288±0.027 0.358±0.043 0.464±0.038 0.646±0.061 anti-miR-656-3p組 2.689±0.1161) 33.657±4.2371) 0.269±0.032 0.264±0.0271) 0.288±0.0191) 0.389±0.0431) anti-miR-656-3p+si-NC組 2.673±0.122 33.761±4.292 0.272±0.031 0.271±0.029 0.281±0.022 0.391±0.041 anti-miR-656-3p+si-ATP10A組 1.537±0.0972) 19.35±2.2012) 0.275±0.026 0.324±0.0372) 0.416±0.0342) 0.618±0.0472) 與anti-NC組相比:1)P<0.05;與anti-miR-635-3P+si-NC組相比:2)P<0.053 討 論
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-29b在2型糖尿病和前期糖尿病患者血清中的表達及臨床意義[J]. 何麗亞,吳政治,王平,夏光云. 安徽醫(yī)藥. 2018(07)
[2]miRNAs在心血管疾病中的作用研究進展[J]. 朱榮梅,薛竟宜,安夢楠. 醫(yī)學綜述. 2018(10)
[3]阿爾茨海默病及其他癡呆診斷與治療臨床轉化研究進展[J]. 李彬寅,徐瑋,鄧鈺蕾,馬建芳,王剛,湯薈冬,丁健青,程琦,陳生弟. 中國現代神經疾病雜志. 2018(02)
[4]阿爾茨海默病患者血清miR-19b-3p表達與認知功能的關系[J]. 徐靜,吳玉泉,許娟,戴毅,焦德敏,胡金華,陳曉娜. 中華行為醫(yī)學與腦科學雜志. 2017 (11)
[5]miR-124-3p通過負調控Caveolin-1表達N2a/APPswe細胞凋亡率及細胞內鈣離子濃度[J]. 向月,張雄,楊軍,戴頌陽,李昱. 重慶醫(yī)科大學學報. 2015(05)
[6]MicroRNA-153對靶基因下游信號分子GSK-3β表達水平及細胞抗損傷能力的影響[J]. 梁春聯,朱華,黃瀾,許艷峰,鄧巍,馬春梅,劉穎,秦川. 中國比較醫(yī)學雜志. 2011(08)
[7]阿爾茨海默病中mir-34a作用機制的探討[J]. 王曉映,劉鵬,朱華,徐艷峰,馬春梅,代小偉,劉穎,秦川. 中國比較醫(yī)學雜志. 2009(10)
本文編號：3302658
【文章來源】：中國老年學雜志. 2020,40(23)北大核心
【文章頁數】：6 頁
【部分圖文】：
各組細胞凋亡流式細胞檢測
表3 雙熒光素酶報告基因驗證miR-656-3p與ATP10A的靶向關系及蛋白表達 ( x ˉ ±s,n=3) 組別 ATP10A-wt ATP10A-mut ATP10A NC組 1.000±0.067 0.296±0.018 0.969±0.057 miR-656-3p組 1.000±0.081 0.998±0.0791) 0.432±0.0281) anti-NC組 1.001±0.073 3.029±0.1272) 1.000±0.062 anti-miR-656-3p組 1.003±0.068 1.000±0.056 2.629±0.1212) 1)與NC組相比,2)與anti-NC組相比,均P<0.052.4 下調ATP10A對AD模型細胞增殖、凋亡的影響
表6 下調miR-656-3p和ATP10A對阿爾茨海默病模型細胞增殖、凋亡的影響 ( x ˉ ±s,n=3) 組別 ATP10A表達量 細胞的凋亡率(%) OD490值 0 h 24 h 48 h 72 h anti-NC組 1.000±0.064 23.098±2.227 0.288±0.027 0.358±0.043 0.464±0.038 0.646±0.061 anti-miR-656-3p組 2.689±0.1161) 33.657±4.2371) 0.269±0.032 0.264±0.0271) 0.288±0.0191) 0.389±0.0431) anti-miR-656-3p+si-NC組 2.673±0.122 33.761±4.292 0.272±0.031 0.271±0.029 0.281±0.022 0.391±0.041 anti-miR-656-3p+si-ATP10A組 1.537±0.0972) 19.35±2.2012) 0.275±0.026 0.324±0.0372) 0.416±0.0342) 0.618±0.0472) 與anti-NC組相比:1)P<0.05;與anti-miR-635-3P+si-NC組相比:2)P<0.053 討 論
【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-29b在2型糖尿病和前期糖尿病患者血清中的表達及臨床意義[J]. 何麗亞,吳政治,王平,夏光云. 安徽醫(yī)藥. 2018(07)
[2]miRNAs在心血管疾病中的作用研究進展[J]. 朱榮梅,薛竟宜,安夢楠. 醫(yī)學綜述. 2018(10)
[3]阿爾茨海默病及其他癡呆診斷與治療臨床轉化研究進展[J]. 李彬寅,徐瑋,鄧鈺蕾,馬建芳,王剛,湯薈冬,丁健青,程琦,陳生弟. 中國現代神經疾病雜志. 2018(02)
[4]阿爾茨海默病患者血清miR-19b-3p表達與認知功能的關系[J]. 徐靜,吳玉泉,許娟,戴毅,焦德敏,胡金華,陳曉娜. 中華行為醫(yī)學與腦科學雜志. 2017 (11)
[5]miR-124-3p通過負調控Caveolin-1表達N2a/APPswe細胞凋亡率及細胞內鈣離子濃度[J]. 向月,張雄,楊軍,戴頌陽,李昱. 重慶醫(yī)科大學學報. 2015(05)
[6]MicroRNA-153對靶基因下游信號分子GSK-3β表達水平及細胞抗損傷能力的影響[J]. 梁春聯,朱華,黃瀾,許艷峰,鄧巍,馬春梅,劉穎,秦川. 中國比較醫(yī)學雜志. 2011(08)
[7]阿爾茨海默病中mir-34a作用機制的探討[J]. 王曉映,劉鵬,朱華,徐艷峰,馬春梅,代小偉,劉穎,秦川. 中國比較醫(yī)學雜志. 2009(10)
本文編號：3302658
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