小麥（Triticum aestivum L.）是全世界種植面積最大的糧食作物。非生物脅迫是制約小麥生產(chǎn)的主要因素,嚴重影響小麥的生長發(fā)育,生物產(chǎn)量和經(jīng)濟產(chǎn)量的形成。隨著全球氣候變化,極端天氣事件頻發(fā),非生物脅迫對小麥生產(chǎn)的影響將進一步加劇。了解小麥的抗逆機理是培育抗逆高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)新品種的前提和基礎。植物在長期進化過程中形成了非常復雜的機制以適應各種各樣的環(huán)境脅迫,其中蛋白質泛素化是應對環(huán)境變化快速、有效的方式之一。U-box型E3泛素連接酶（PUB）是植物特有的一類E3連接酶,參與對多種逆境脅迫的應答。本研究以極抗旱小麥品種旱選10號為材料,克隆了泛素連接酶基因TaPUB57-2A,基因表達分析發(fā)現(xiàn)TaPUB57-2A參與對多種逆境脅迫的應答,為進一步明確其與小麥抗逆性的關系,揭示其參與抗逆應答的分子機制,開展了一系列研究,通過啟動子區(qū)順式作用元件分析、基因表達模式分析、體外泛素化、蛋白互作和轉基因水稻功能分析等,明確了TaPUB57-2A在不同逆境脅迫下的表達模式,初步揭示了其在逆境脅迫應答中的功能。主要研究結果如下:（1）克隆了小麥TaPUB57-2A的基因組序列,發(fā)現(xiàn)它有12個外顯... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

泛素-蛋白酶體途徑（RahimiN,2012）

U-box型泛素連接酶的分類（RYUetal.,2019）

中國農(nóng)業(yè)科學院碩士學位論文第一章緒論11論依據(jù)。1.5.2技術路線本研究以優(yōu)異抗旱小麥品種旱選10號為材料，克隆泛素連接酶基因TaPUB57-2A。在苗期分別進行干旱（PEG-6000）、高鹽、低溫及ABA處理，采用qRT-PCR方法分析TaPUB57-2A在不同逆境處理下的表達模式。轉化水稻，在獲得轉基因純系后在苗期進行鹽處理，通過形態(tài)學觀察和生理生化指標測定，解析目標基因的生物學功能。通過體外泛素化實驗，明確TaPUB57-2A是否具有E3連接酶活性。篩選酵母文庫，發(fā)現(xiàn)候選互作蛋白，并通過酵母雙雜交、螢火蟲熒光素酶互補、Pull-down等試驗進一步驗證。通過泛素化分析，進一步明確互作蛋白是否為TaPUB57-2A的靶蛋白。綜合以上研究結果，以期明確TaPUB57-2A的生物學功能，揭示其參與逆境脅迫應答的生理和分子機制。具體技術路線見圖1-3。圖1-3技術路線Fig.1-3Technicalstrategy


本文編號：3302613