[目的]探討沉默SALL4基因對乳腺癌耐藥細胞MCF-7/A的增殖及化療敏感性的影響。[方法]q RT-PCR和Western Blot實驗檢測MCF-7、MCF-7/A細胞內SALL4表達水平,運用慢病毒包裝sh RNA方法沉默MCF-7/A細胞的SALL4基因;實驗組（Lv-sh SALL4）、陰性對照組（Lv-sh NC）和空白對照組（CON）。CCK8法、克隆形成實驗檢測SALL4沉默對細胞增殖能力的影響;CCK8法檢測表柔比星處理細胞24h和48h的半數(shù)抑制濃度(IC₅₀);流式細胞儀檢測細胞凋亡。[結果]SALL4在MCF-7/A細胞中的表達水平顯著高于MCF-7（P<0.05）。MCF-7/A細胞中SALL4基因被成功沉默,病毒感染MCF-7/A細胞72h后,細胞感染效率約95%,沉默SALL4基因后MCF-7/A細胞內SALL4 m RNA及蛋白表達均明顯降低（P<0.05）。沉默MCF-7/A細胞的SALL4基因,顯著抑制了細胞的增殖能力（P<0.05）,增強了細胞對表柔比星的敏感性;表柔比星24h和48h的IC_50<... 

【文章來源】：中國腫瘤. 2016,25(02)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)
        1.2.2 q RT-PCR檢測細胞內SALL4 m RNA相對表達量
        1.2.3 Western blot實驗檢測細胞內SALL4 蛋白相對含量
        1.2.4 MCF-7/A細胞內SALL4 基因沉默效率的檢測
        1.2.5 CCK8 法繪制細胞生長曲線
        1.2.6 克隆形成實驗
        1.2.7 CCK8 法檢測表柔比星處理MCF-7/A細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)
        1.2.8 流式細胞術檢測表柔比星誘導的細胞凋亡
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 MCF-7、MCF-7/A細胞中SALL4 基因表達水平的差異
    2.2 MCF-7/A細胞中SALL4 基因敲減效率檢測
    2.4 沉默SALL4 基因增強MCF-7/A細胞對表柔比星的敏感性
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]乳腺癌多藥耐藥細胞系MCF-7/A的建立[J]. 洪理泉,柯衛(wèi)鋒,潘峰,陳兆軍,劉玉華.  浙江醫(yī)學. 2012 (17)



本文編號：3236911