目的:現(xiàn)今在社會、經(jīng)濟等多種因素的影響下不孕癥是當下育齡人群面臨的一大問題。隨著近年來對非編碼小RNA的深入研究,miRNA在生殖生物學中的作用逐步被發(fā)現(xiàn)。成功的受孕需要優(yōu)質的胚胎與合適的子宮內膜共同作用,胚胎是否能夠植入子宮內膜決定了妊娠結局,因此母胎之間的“交流”一直是生殖醫(yī)學領域的重要研究方向之一。已發(fā)現(xiàn)在胚胎著床期,子宮內膜miRNA存在差異表達,本文尋找差異表達的miR-155、miR-146a所調控的靶基因及其表達規(guī)律,探討miRNA在子宮內膜容受性方面的作用。方法:基于小鼠囊胚在妊娠第4天晚上著床,本實驗建立妊娠鼠模型,分別在種植窗口期（妊娠第4、5天）和種植前期（妊娠第1天）取材;為排除胚胎的影響,建立假孕鼠模型,同樣在種植窗期（假孕第4、5天）和種植前期（假孕第1天）取材。使用Q-PCR方法檢測小鼠子宮內膜組織中miRNA（miR-155、miR-146a）及mRNA（Sirt1、MMP16）的表達水平,Western blotting方法檢測小鼠子宮內膜組織中Sirt1及MMP16的表達規(guī)律,免疫組化檢測MMP16蛋白在子宮內膜組織中的定位及相對表達量。在進行miR... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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摘要
ABSTRACT
前言
研究材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 實驗動物
        1.2 實驗細胞
    2 主要實驗試劑和儀器
        2.1 主要試劑
        2.2 主要儀器
    3 主要實驗方法
        3.1 早孕小鼠模型建立
        3.2 假孕小鼠模型建立
        3.3 miRNA agomir體內注射
        3.4 小鼠子宮組織收集
        3.5 細胞培養(yǎng)
        3.6 microRNA合成與轉染
        3.7 組織脫水包埋
        3.8 石蠟切片
        3.9 HE染色
        3.10 免疫組化
        3.11 蛋白免疫印跡（Western Blot）
        3.12 Total RNA抽提及質檢
        3.13 RNA逆轉錄
        3.14 實時定量PCR
        3.15 統(tǒng)計分析
結果
    1 動物實驗
        1.1 小鼠子宮大體觀以及HE染色
        1.2 小鼠子宮組織中miR-155及miR-146a的變化
        1.3 小鼠子宮中Srit1 以及MMP16 的表達
        1.4 miRNA agomir宮角注射后Sirt1和MMP16 的表達變化
        1.5 免疫組化檢測小鼠子宮內膜組織中MMP16 的表達
        1.6 Q-PCR檢測小鼠子宮內膜組織中Sirt1和MMP16 的表達
    2 人子宮內膜細胞Sirt1和MMP16 蛋白的表達
討論
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
作者簡介及讀研期間主要科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3116017