背景冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(Coronary artery disease)簡(jiǎn)稱冠心病,是在全球范圍內(nèi)導(dǎo)致死亡的主要病因。遺傳因素在冠心病中的作用備受關(guān)注。血小板源生長(zhǎng)因子D基因(Platelet-derived growth factor D gene,PDGFD)是血小板源性生長(zhǎng)因子家族蛋白的一員,它參與機(jī)體的發(fā)育與生理過(guò)程,同時(shí)也與腫瘤、纖維性疾病以及動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)PDGFD轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物高表達(dá)于心臟。該產(chǎn)物通過(guò)影響基質(zhì)金屬蛋白酶的活性、單核細(xì)胞遷移以及抑制平滑肌細(xì)胞基因的表達(dá)促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化。全基因組關(guān)聯(lián)研究組織對(duì)韓國(guó)人的調(diào)查結(jié)果顯示PDGFD基因rs974819多態(tài)性與冠心病存在顯著關(guān)系,由于不同種族基因存在差異,目前尚無(wú)中國(guó)漢人方面的相關(guān)資料。目的研究PDGFD基因多態(tài)性是否與豫北漢族人口冠心病存在關(guān)聯(lián)性;并通過(guò)基因分型探討其與冠心病易患因素、病變嚴(yán)重程度的相關(guān)聯(lián)系性,為漢族人口冠心病早期干預(yù)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供更多的依據(jù)。方法1.提取DNA冠心病組179例對(duì)照組94例晨起空腹抽取5ml靜脈血,EDTA-K2抗凝,利用QIAam DNA Blood Mini Kit試劑盒提取基因,Nano Drop-2000微量核酸蛋白檢測(cè)儀檢測(cè),-80℃保存?zhèn)溆谩?.獲取目的基因設(shè)計(jì)引物,行PCR獲取目的基因片段同時(shí)擴(kuò)增目的基因片段,電泳驗(yàn)證目的基因。3.基因分型純化目的基因,利用金唯智生物科技(北京)有限公司Big Dye v3.1試劑盒在ABI3730XL測(cè)序儀上直接測(cè)序。Snap Gene Viewer軟件分析測(cè)序的基因型。4.SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1.兩組年齡、性別一般資料無(wú)明顯差別(P0.05),但冠心病組吸煙、糖尿病、高血壓病、高脂血癥比例高(P0.05),冠心病組HDL-c低(P0.05)。2.PDGFD基因rs974819多態(tài)位點(diǎn)存在AA型、AG型及GG型3種基因型。3.rs974819位點(diǎn)兩種等位基因在冠心病組分布頻率分別是60.9%、39.1%,在對(duì)照組中分別為64.0%、36.0%,兩組間等位基因頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.63,P0.05)。AA、AG、GG基因型在冠心病組中的分布頻率分別為35.8%、50.3%、13.9%,在對(duì)照組中分別為42.6%、43.6%、13.8%,兩組間基因型頻率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.37,P0.05)。豫北漢族人群A等位基因頻率冠心病組及正常對(duì)照組分別為0.609及0.640,高于歐洲人群A等位基因頻率0.410,PDGFD基因位點(diǎn)A、G等位基因及AA、AG、GG基因型兩組間頻率分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.冠心病組患者AA、AG、GG基因型之間冠心病嚴(yán)重程度Gensini Score評(píng)分分別是53.47±28.51、42.28±23.94、34.92±23.46,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1、PDGFD基因rs974819多態(tài)性可能與豫北地區(qū)漢族人群冠心病遺傳易感無(wú)關(guān)。2、PDGFD基因突變純合子與冠心病嚴(yán)重程度有關(guān),冠心病攜帶PDGFD基因突變純合子AA基因型的患者冠脈狹窄更重。
【學(xué)位單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：R541.4
【部分圖文】：

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文10圖1 技術(shù)路線圖注：研究方法符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，且均已告知風(fēng)險(xiǎn)并簽署知情同意書(shū)。1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組選擇2015年2月至2015年10月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院收治的179例冠心病患者及同期健康體檢者94例（對(duì)照)。兩組樣本均排除嚴(yán)重的肝腎疾病、甲狀腺功能減低癥、甲狀腺功能亢進(jìn)癥、風(fēng)濕免疫疾病、心肌病和先天性心臟病。冠心病組均符合以取全血組織冠心病組 正常對(duì)照試劑盒提 DNAPCR 獲取目的基因PCR 鈍化目的基因

圖2 2%瓊脂糖凝膠電泳鑒定因分型結(jié)果因分型利用金唯智生物科技（北京）有限公司 BigDye v3.1 試劑盒，在 ABI 測(cè)序儀上直接測(cè)序完成。經(jīng)分析在豫北漢族人口種共獲得 GG、AG、AA 三型。如圖 3、圖 4、圖 5。G/G

新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文圖2 2%瓊脂糖凝膠電泳鑒定（3）基因分型結(jié)果基因分型利用金唯智生物科技（北京）有限公司 BigDye v3.1 試劑盒，在3730XL 測(cè)序儀上直接測(cè)序完成。經(jīng)分析在豫北漢族人口種共獲得 GG、AG、A種基因型。如圖 3、圖 4、圖 5。目的基因(約 453bp)
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