本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物檢測新技術(shù)研究進展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河南師范大學》 2013年

轉(zhuǎn)Cry1Ab抗蟲基因玉米的分子生物學研究

陳小潔  

【摘要】：玉米(Zea mays L.)是世界上重要的糧食作物、飼料原料和能源作物，隨著世界經(jīng)濟的持續(xù)發(fā)展和人口的不斷增長，我國對玉米的需求量呈增長趨勢。隨著環(huán)境的日益惡化，玉米的病蟲害越來越重。據(jù)FAO統(tǒng)計，每年全世界因蟲害造成的玉米損失約占產(chǎn)量的12%，因此提高玉米單產(chǎn)，培育抗病、抗蟲等玉米新品種顯得十分迫切。1996年第一例轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植后，全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積持續(xù)增長，2009年達到1.34億公頃。目前，作物新品種的培育已由傳統(tǒng)的選育逐漸向利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育方向轉(zhuǎn)換。 本研究通過基因槍介導法將人工改造的Cry1Ab抗蟲基因轉(zhuǎn)入HiⅡB玉米愈傷組織中，獲得轉(zhuǎn)Cry1Ab基因陽性玉米苗；通過比較轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米各組織部位Cry1Ab基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達量，探討了各組織部位的抗蟲性與玉米生物學特性之間的關(guān)系；通過對轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米進行接蟲，，探討了Cry1Ab蛋白表達的有效性，為抗蟲Cry1Ab基因的研究提供參考。通過調(diào)查分析轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株的農(nóng)藝性狀，探討了轉(zhuǎn)基因玉米和對照玉米植株產(chǎn)量的變化情況，為轉(zhuǎn)基因玉米的育種工作提供依據(jù)。 1、本研究通過基因槍轟擊法成功將人工改造Cry1Ab基因轉(zhuǎn)入玉米愈傷組織中，并獲得了轉(zhuǎn)基因玉米植株，PCR檢測陽性苗為9株；試紙條鑒定Bt蛋白表達的T0代轉(zhuǎn)基因陽性苗5株；T0代共3株轉(zhuǎn)基因玉米收獲種子。 2、對轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米自交系T1代到T3代進行PCR和免疫試紙條檢測，獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株；統(tǒng)計T1代至T3代PCR檢測陽性率，與孟德爾的分離規(guī)律相比偏小。造成這種現(xiàn)象的原因可能是由于基因槍轟擊愈傷組織可引起的拷貝數(shù)多。 3、本研究通過RT-PCR和熒光定量PCR對穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米各組織部位Cry1Ab基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達進行檢測，結(jié)果表明葉片中Cry1Ab的表達量顯著高于葉鞘和根部。 4、通過統(tǒng)計分析接蟲后轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米和對照組玉米心葉期的蟲孔數(shù)及受害程度，將轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米分為高抗和高感。統(tǒng)計分析接蟲后成熟期的玉米植株莖稈和果穗各部位的蟲孔數(shù)及受害程度，結(jié)果表明，T1至T3代轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米與對照相比，苞葉上的蟲孔數(shù)（P0.05），苞葉蟲孔面積（P0.05）、莖蟲孔數(shù)（P0.05）、莖蟲孔面積（P0.05）、籽粒受害部位（P0.05）和籽粒受害數(shù)（P0.05）均小于對照組。說明轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米對玉米螟的抗性顯著高于對照HiⅡ B。進一步鑒定了目的性狀的有效性，證明目的基因轉(zhuǎn)入玉米植株中，且目的蛋白得到有效表達。 5、田間農(nóng)藝性狀調(diào)查結(jié)果表明，與對照HiⅡ B相比，轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株產(chǎn)量穩(wěn)定，略有增加趨勢，差異不顯著(P0.05)。

【關(guān)鍵詞】：
【學位授予單位】：河南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：S513
【目錄】：

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10 黃智鴻;王思遠;包巖;梁煊赫;孫剛;申林;曹洋;吳春勝;;超高產(chǎn)玉米品種干物質(zhì)積累與分配特點的研究[A];中國作物學會2006年學術(shù)年會論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者 彭溢;[N];黑龍江日報;2009年

2 記者 劉倩倩;[N];威海日報;2009年

3 YMG記者 滕新書　通訊員 宋偉 王楊;[N];煙臺日報;2009年

4 通訊員 李有�！±铄\鋒;[N];紅河日報;2009年

5 記者 李志宏;[N];喀什日報(漢);2009年

6 記者 肖文;[N];遵義日報;2010年

7 記者 韓成斌;[N];蘭州日報;2010年

8 高福平;[N];呂梁日報;2010年

9 馬龍縣舊縣鎮(zhèn)農(nóng)科站 王選萍;[N];云南科技報;2011年

10 特約記者 蔣兵;[N];自貢日報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張志勇;RNA干擾抗矮花葉病轉(zhuǎn)基因玉米培育[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2010年

2 王瑞霞;花器官分化期玉米干旱脅迫的蛋白質(zhì)組學研究和170個地方種的遺傳多樣性分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2012年

3 劉志誠;Bt水稻對稻田節(jié)肢動物群落和優(yōu)勢天敵的生態(tài)風險評價[D];浙江大學;2002年

4 溫洪濤;玉米bHLH類轉(zhuǎn)錄因子ABP7基因功能分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2011年

5 朱敏;紫玉米高產(chǎn)栽培生理機制及其花青素特性研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2011年

6 孫建華;玉米施鋅吸收積累及有效化調(diào)控機理的研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2013年

7 杜偉;有機無機復混肥優(yōu)化化肥養(yǎng)分利用的效應(yīng)與機理[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2010年

8 宗毓錚;大氣二氧化碳濃度升高對玉米幼苗碳氮資源分配的影響[D];中國科學院研究生院（教育部水土保持與生態(tài)環(huán)境研究中心）;2013年

9 郎志宏;馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）花粉特異表達基因SBLR的克隆、分析及對玉米的遺傳轉(zhuǎn)化[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2003年

10 許樹成;Ca~+-CaM活化型蛋白激酶在ABA誘導的玉米葉片抗氧化防護過程中的作用[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳小潔;轉(zhuǎn)Cry1Ab抗蟲基因玉米的分子生物學研究[D];河南師范大學;2013年

2 黃才浚;以愈傷組織為受體轉(zhuǎn)化玉米光敏色素基因[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2010年

3 李敬娜;農(nóng)桿菌介導的抗草甘膦基因玉米遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];海南大學;2010年

4 王軍;玉米新品種福單2號選育及高產(chǎn)配套技術(shù)研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2010年

5 馮敏;中國玉米需求分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2011年

6 鄭德春;高淀粉玉米新品種及其高產(chǎn)高效配套生產(chǎn)技術(shù)的示范與推廣[D];延邊大學;2010年

7 陳靖;玉米幼嫩葉段再生體系的建立及EPA在玉米中的異源合成[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

8 呂霞;Cry1A基因改造及其對玉米的遺傳轉(zhuǎn)化[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2013年

9 南文華;玉米新品種陜單22選育及適應(yīng)性分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2010年

10 張佩;玉米精氨酸酶基因ZmArg的克隆與遺傳轉(zhuǎn)化[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2013年

  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物檢測新技術(shù)研究進展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：228041