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抑制DBC2基因啟動子甲基化促進乳腺癌細胞凋亡的研究

發(fā)布時間:2018-08-08 15:21
【摘要】:目的研究抑癌基因DBC2在乳腺癌的表達與甲基化狀態(tài)之間的聯(lián)系,及其對乳腺癌細胞系T-47D細胞增殖和凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)3種乳腺癌細胞株(T-47D、MCF-7、MDA-MB-23)和正常乳腺細胞株(MCF-10),檢測4種細胞中DBC2基因的表達及其啟動子區(qū)甲基化狀況;5-Aza-Cd R處理T-47D細胞后,檢測5-Aza-Cd R對T-47D細胞DBC2啟動子甲基化狀態(tài)和其表達的影響,并通過MTT和Annexin-V/PI雙染法分別檢測處理前后T-47D細胞增殖和凋亡的變化。結(jié)果 DBC2在T-47D細胞表達缺失,乳腺癌細胞DBC2啟動子發(fā)生甲基化;5-Aza-Cd R成功逆轉(zhuǎn)了T-47D細胞DBC2的甲基化狀態(tài),并使DBC2 m RNA表達恢復(fù)(P0.05);不同濃度的5-Aza-Cd R處理T-47D細胞后,T-47D細胞增殖下降(P0.05),凋亡率增加(P0.05)。結(jié)論 DBC2啟動子甲基化導(dǎo)致T-47D細胞DBC2表達沉默,激活DBC2表達可抑制T-47D細胞增殖并促進其凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the relationship between the expression of tumor suppressor gene DBC2 and methylation status in breast cancer and its effect on the proliferation and apoptosis of breast cancer cell line T-47D. Methods three kinds of breast cancer cell lines (T-47D- MCF-7MDA-MB-23) and normal mammary gland cell line (MCF-10) were cultured in vitro. The expression of DBC2 gene and the methylation status of its promoter region were detected after T-47D cells were treated with 5-Aza-CD R. The effects of 5-Aza-Cd R on the methylation status and expression of DBC2 promoter in T-47D cells were detected. The proliferation and apoptosis of T-47D cells were detected by MTT and Annexin-V/PI double staining. Results the expression of DBC2 was absent in T-47D cells, and the methylation of DBC2 promoter in breast cancer cells was successfully reversed by 5-Aza-CD R, which reversed the methylation of DBC2 in T-47D cells. The expression of DBC2 m RNA was restored (P0.05), and the proliferation of T-47D cells decreased (P0.05) and the apoptosis rate increased (P0.05) after treated with different concentrations of 5-Aza-Cd R (P0.05). Conclusion methylation of DBC2 promoter induces silencing of DBC2 expression in T-47D cells, and activation of DBC2 expression can inhibit the proliferation of T-47D cells and promote their apoptosis.
【作者單位】: 河南省中醫(yī)院乳腺科;
【分類號】:R737.9

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