本文選題：核受體亞家族A + 受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶　； 參考：《中國(guó)病理生理雜志》2017年09期

【摘要】：目的:探討核受體亞家族6A1(NR6A1)對(duì)血管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響及可能的分子機(jī)制。方法:將腺病毒Ad-NR6A1感染大鼠血管平滑肌細(xì)胞,分別在感染后0 h、24 h和48 h時(shí)進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn),以時(shí)間為橫坐標(biāo),A570為縱坐標(biāo)繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,觀察NR6A1對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響;進(jìn)行DAPI染色、TUNEL染色及caspase活性檢測(cè),觀察細(xì)胞凋亡情況;進(jìn)一步通過(guò)基因芯片技術(shù),尋找NR6A1的靶基因;采用siRNA介導(dǎo)的基因沉默技術(shù),觀察受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶3(RIPK3)基因沉默對(duì)NR6A1誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:腺病毒Ad-NR6A1感染細(xì)胞48 h時(shí),NR6A1過(guò)表達(dá)組細(xì)胞數(shù)量較對(duì)照組(重組腺病毒載體Ad-Lac Z)明顯減少;DAPI染色顯示NR6A1過(guò)表達(dá)誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞出現(xiàn)核濃縮和核碎裂的凋亡表型,TUNEL染色顯示NR6A1過(guò)表達(dá)引起細(xì)胞凋亡,caspase活性檢測(cè)結(jié)果顯示NR6A1過(guò)表達(dá)細(xì)胞內(nèi)caspase-3、caspase-8和caspase-9活性均較對(duì)照組高;基因芯片技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),NR6A1過(guò)表達(dá)上調(diào)血管平滑肌細(xì)胞中RIPK3基因表達(dá);RIPK3基因沉默可以顯著抑制NR6A1誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞凋亡。結(jié)論:NR6A1通過(guò)上調(diào)RIPK3基因表達(dá)誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of nuclear receptor subfamily 6A1NR6A1 on apoptosis of vascular smooth muscle cells (VSMCs) and its possible molecular mechanism. Methods: rat vascular smooth muscle cells (VSMCs) were infected with adenovirus Ad-NR6A1. The MTT experiments were carried out at 24 h and 48 h after infection respectively. The cell growth curves were drawn with the time axis A570 as the vertical coordinate to observe the effect of NR6A1 on the cell growth. DAPI staining, Tunel staining and caspase activity detection were used to observe the apoptosis of cells; to further search for the target genes of NR6A1 by gene chip technology; to use siRNA mediated gene silencing, To observe the effect of receptor interaction serine / threonine protein kinase 3 (RIPK3) gene silencing on apoptosis of vascular smooth muscle cells induced by NR6A1. Results: after 48 h of adenovirus Ad-NR6A1 infection, the number of NR6A1 overexpression group was significantly lower than that of control group (recombinant adenovirus vector Ad-Lac Z). NR6A1 overexpression induced nuclear condensation and nuclear fragmentation in vascular smooth muscle cells. Apoptosis induced by NR6A1 overexpression was detected by Tunel staining. The results showed that the activities of caspase-3, caspase-8 and caspase-9 in NR6A1 overexpression cells were higher than those in control group. Gene chip technique showed that the overexpression of NR6A1 up-regulated the expression of RIPK3 gene and the silencing of RIPK3 gene could significantly inhibit the apoptosis of smooth muscle cells induced by NR6A1. Conclusion the apoptosis of vascular smooth muscle cells was induced by up-regulating the expression of RIPK3 gene in vascular smooth muscle cells.
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【基金】：湖北省教育廳科學(xué)研究計(jì)劃指導(dǎo)性項(xiàng)目(No.B2015492) 湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2014CFB187) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81641140)
【分類號(hào)】：R363

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本文編號(hào)：1949410