本文關(guān)鍵詞：新Cry1B蛋白基因的篩選與鑒定

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【摘要】：[目的]Cry1B類(lèi)殺蟲(chóng)蛋白對(duì)鱗翅目和鞘翅目昆蟲(chóng)具有較好的殺蟲(chóng)活性,具有廣闊的應(yīng)用前景。為進(jìn)一步挖掘并研究Cry1B類(lèi)蛋白。[方法]本文使用一對(duì)引物對(duì)24個(gè)Bt菌株進(jìn)行定性PCR反應(yīng),嘗試篩選新的cry1B基因。該引物能夠擴(kuò)增包括Cry1B蛋白N-端3個(gè)結(jié)構(gòu)域在內(nèi)的718個(gè)氨基酸編碼序列。[結(jié)果]共有8個(gè)菌株包含cry1B基因,約占篩選菌株的33.3%。序列分析發(fā)現(xiàn),獲得8個(gè)基因中有6個(gè)為新基因,其中6-1和15-1基因編碼氨基酸序列與Cry1Bd1完全相同;9-1、10-1、18-1、20-1和21-1對(duì)應(yīng)氨基酸序列與Cry1Bd1的一致性≥98.5%;而4-1基因編碼的氨基酸序列與Cry1Bb1和Cry1Bc1蛋白N-端僅差1個(gè)氨基酸,需要進(jìn)一步鑒定C-端長(zhǎng)尾的編碼序列以判斷其所屬亞類(lèi)。[結(jié)論]本研究獲得6種新型Cry1B蛋白基因,為進(jìn)一步解析這類(lèi)蛋白的殺蟲(chóng)活性和機(jī)理提供了豐富的材料。
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)生物工程研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31601690) 山西省基礎(chǔ)研究項(xiàng)目自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2015011080) 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)科技創(chuàng)新基金(2014015)
【分類(lèi)號(hào)】：S476
【正文快照】： 目前,蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringien-sis,Bt)表達(dá)的晶體殺蟲(chóng)蛋白依然是轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)作物的主要功能蛋白。其中,Cry1B類(lèi)對(duì)鱗翅目的歐洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)、亞洲玉米螟(Os-trinia furnacalis)、小菜蛾(Plutella xylostella)、馬鈴薯塊莖蛾(Phthorimaea operculella

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本文編號(hào)：1289116