本文關(guān)鍵詞：發(fā)狀念珠藻過氧化物還原酶NfPrx基因的克隆與表達分析

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【摘要】：過氧化物還原酶(peroxiredoxin,Prx)屬抗氧化蛋白超家族,為了探究Prx在發(fā)狀念珠藻抗逆過程中所具有的生物學(xué)功能,從發(fā)狀念珠藻細胞中克隆了NfPrx基因的完整開放閱讀框(ORF),并對基因序列特征進行了生物信息學(xué)分析,根據(jù)氨基酸序列預(yù)測了該蛋白的三維結(jié)構(gòu),在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了基因的融合表達載體并誘導(dǎo)其表達,同時探討了PEG-6000脅迫下NfPrx的表達特性。結(jié)果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,編碼203個氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys結(jié)構(gòu)域,屬于硫氧還蛋白超基因家族,與點形念珠藻、絲狀藍藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物種的Prx氨基酸序列一致性高達94%以上。NfPrx與點形念珠藻處在同一進化枝上,具有較近的親緣關(guān)系。利用所構(gòu)建的原核表達載體,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)和SDS-PAGE電泳,證實誘導(dǎo)表達的NfPrx蛋白與預(yù)期結(jié)果大小一致。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,NfPrx的表達隨干旱脅迫程度的增加先增后降,PEG-6000濃度為8%時,表達量達到峰值,根據(jù)表達特性,推測過氧化物還原酶可能參與響應(yīng)發(fā)狀念珠藻逆境脅迫過程。
【作者單位】： 寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院西部特色生物資源保護與利用教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31360025、31260023、31360361和31560418)~~
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： 收稿2016-06-07修定2016-07-20資助國家自然科學(xué)基金(31360025、31260023、31360361和31560418)。當生物在遭受生物和非生物脅迫后,會導(dǎo)致體內(nèi)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量增加,對細胞造成傷害,從而影響細胞的生長(張海燕等2009)。生物在進化過程中形成了一套完

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本文編號：1206543