本文關(guān)鍵詞：循環(huán)型m icroRNA-92a在先天性巨結(jié)腸中的表達(dá)及上調(diào)CDX2基因的研究

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【摘要】：目的探討循環(huán)型micro RNA-92a(mi R-92a)在先天性巨結(jié)腸(HD)中的表達(dá),以及通過(guò)上調(diào)尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子-2(CDX2)基因抑制腸神經(jīng)干細(xì)胞(ENSCs)增殖的可能機(jī)制。方法選取2013年1月-2015年12月在山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院行先天性巨結(jié)腸根治術(shù)16例HD患兒的術(shù)前血清標(biāo)本。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)檢測(cè)血清mi R-92a m RNA的表達(dá)。提取孕15 d胎鼠腸管ENSCs,通過(guò)免疫學(xué)方法鑒定ENSCs;免疫磁珠法分選Nestin+ENSCs,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染使Nestin+ENSCs內(nèi)過(guò)表達(dá)mi R-92a,噻唑藍(lán)法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性,q RT-PCR、Western blot檢測(cè)CDX2基因的表達(dá)。結(jié)果 HD患兒血清中mi R-92a m RNA的相對(duì)表達(dá)量為(23.5±4.66),高于對(duì)照組(t=12.661,P=0.000);ENSCs細(xì)胞培養(yǎng)早期Nestin染色陽(yáng)性,具有向Tuj-1陽(yáng)性、膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽(yáng)性細(xì)胞分化的潛能;ENSCs過(guò)表達(dá)mi R-92a后,CDX2 m RNA的相對(duì)表達(dá)為(13.024±3.882),高于對(duì)照組(F=47.212,P=0.000),CDX2蛋白表達(dá)為(0.436±0.0828),高于對(duì)照組(F=48.793,P=0.000),細(xì)胞的增殖活性在轉(zhuǎn)染后24、48和72 h明顯受抑制。結(jié)論 mi R-92a通過(guò)上調(diào)CDX2基因的表達(dá),抑制ENSCs的增殖,可能促進(jìn)HD發(fā)生、發(fā)展。
【作者單位】： 山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院小兒外科;山東省臨沂市沂水中心醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【分類號(hào)】：R726.5
【正文快照】： 先天性巨結(jié)腸(hirschsprung's disease,HD)是小兒外科常見的先天性消化道畸形[1]。有研究發(fā)現(xiàn)在胚胎發(fā)育過(guò)程中,腸神經(jīng)干細(xì)胞(enteric neural stemcells,ENSCs)通過(guò)不斷的遷移、增殖和分化,形成腸道的神經(jīng)系統(tǒng),當(dāng)各種原因引起腸道神經(jīng)系統(tǒng)的正常形成時(shí),將導(dǎo)致腸道神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的

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