本文關(guān)鍵詞：核酸適配體應(yīng)用于雙酚A快速檢測新方法研究

  更多相關(guān)文章： 環(huán)境內(nèi)分泌干擾物 雙酚A 生物傳感器 納米金 檢測

【摘要】：大量研究發(fā)現(xiàn)雙酚A是一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,對人體具有致癌、致畸和致突變等危害,會影響嬰幼兒的正常成長發(fā)育。傳統(tǒng)的雙酚A檢測方法具有靈敏度高、精確度好、重復(fù)性好等優(yōu)點,但同時還具有檢測費用高、需要精密儀器、無法滿足快速實時檢測的缺點。因此,亟需開發(fā)一種簡便、快速靈敏的雙酚A檢測方法。核酸適配體能與靶標(biāo)進(jìn)行也異性結(jié)合,在檢測中具有其獨特的優(yōu)越性,因而本研究以核酸適配體為基礎(chǔ),開發(fā)出三種不同的比色法快速實時檢測環(huán)境中雙酚A的方法：(1)開發(fā)了一種利用納米顆粒催化TMB/H2O2法檢測雙酚A的技術(shù)。納米金顆粒具有一定的催化活性,可以催化TMB/H2O2顯淡藍(lán)色；而核酸適配體包裹的AuNPs顆粒的催化活性增強(qiáng),催化TMB/H2O2顯深藍(lán)色。在最優(yōu)檢測條件下,對雙酚A的檢測線性范圍為6.79～1500 nM,最低檢測限為6.79 nM。(2)開發(fā)了一種基于雙酚A特異性核酸適配體的表面活性劑CTAB聚集納米金比色法檢測雙酚A的技術(shù)。該方法中CTAB具有兩方面的作用：一是可以與適配體發(fā)生反應(yīng)形成超分子結(jié)構(gòu)的復(fù)合物；其次是CTAB能破壞納米金表面的靜電平衡使得其發(fā)生聚集,從而導(dǎo)致溶液的顏色發(fā)生由酒紅到藍(lán)色的變化。在最優(yōu)檢測條件下,該反應(yīng)體系對雙酚A的檢測限為3.2 nM,線性范圍為0.032μM～2.0 μM,對河水中雙酚A的加標(biāo)回收率為100.1%～108.5%。(3)開發(fā)了一種基于雙酚A特異性核酸適配體的陽離子聚合物PDDA聚集納米金比色法檢測雙酚A的技術(shù)。本技術(shù)的關(guān)鍵是PDDA既能與適配體通過靜電力結(jié)合形成類似“雙鏈”結(jié)構(gòu),同時又具有破壞納米金顆粒之間的靜電平衡使其發(fā)生聚集的功能。該檢測方法具有良好的特異性,檢測線性范圍為1.50～500 nM,對雙酚A的檢測下限為1.50 nM,對自來水和河水的加標(biāo)回收率范圍為100.94～112.71%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.72～13.08%。
【關(guān)鍵詞】：環(huán)境內(nèi)分泌干擾物 雙酚A 生物傳感器 納米金 檢測
【學(xué)位授予單位】：上海應(yīng)用技術(shù)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：X830;O657.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-11
• 第一章 緒論11-22
• 1.1 雙酚A11-14
• 1.1.1 雙酚A簡介11
• 1.1.2 雙酚A制品的應(yīng)用11-12
• 1.1.3 雙酚A的毒性及其危害12-13
• 1.1.4 雙酚A的污染現(xiàn)狀13-14
• 1.1.5 雙酚A的國家規(guī)定14
• 1.2 傳統(tǒng)的雙酚A檢測方法及存在的不足14-16
• 1.2.1 傳統(tǒng)雙酚A檢測方法14-15
• 1.2.2 傳統(tǒng)檢測方法的不足15-16
• 1.3 核酸適配體技術(shù)及其在檢測中的應(yīng)用16-20
• 1.3.1 核酸適配體簡介16-17
• 1.3.2 核酸適配體技術(shù)的優(yōu)點17
• 1.3.3 核酸適配體技術(shù)檢測雙酚A信號輸出方法17-20
• 1.4 課題研究的目的和意義20-22
• 第二章 基于適配體包裹納米金催化TMB/H_2O_2比色法檢測雙酚A22-31
• 2.1 前言22
• 2.2 實驗材料22-23
• 2.2.1 主要實驗試劑22-23
• 2.2.2 主要儀器23
• 2.3 實驗方法23-24
• 2.3.1 無修飾納米金溶液的制備23
• 2.3.2 比色信號的測量23-24
• 2.3.3 檢測體系的條件優(yōu)化24
• 2.3.4 檢測體系的靈敏度和特異性24
• 2.4 結(jié)果與討論24-30
• 2.4.1 檢測原理24-26
• 2.4.2 AuNPs催化性能研究26-27
• 2.4.3 檢測體系的條件優(yōu)化27-29
• 2.4.4 檢測體系的靈敏度和特異性29-30
• 2.5 本章小節(jié)30-31
• 第三章 基于適配體的表面活性劑聚集納米金比色法檢測雙酚A31-40
• 3.1 引言31
• 3.2 實驗材料31-32
• 3.2.1 主要實驗試劑31
• 3.2.2 主要儀器31-32
• 3.3 實驗方法32-33
• 3.3.1 納米金的制備32
• 3.3.2 檢測條件的優(yōu)化32
• 3.3.3 雙酚A的檢測步驟32-33
• 3.3.4 水樣預(yù)處理和加標(biāo)回收實驗分析33
• 3.4 結(jié)果與討論33-39
• 3.4.1 實驗原理33-34
• 3.4.2 納米金的表征34
• 3.4.3 反應(yīng)條件的優(yōu)化34-37
• 3.4.4 檢測體系靈敏度和特異性37-38
• 3.4.5 加標(biāo)回收實驗結(jié)果38-39
• 3.5 本章小結(jié)39-40
• 第四章 基于適配體的陽離子聚合物聚集納米金比色法檢測雙酚A40-51
• 4.1 前言40
• 4.2 實驗材料40-41
• 4.2.1 主要實驗試劑40
• 4.2.2 主要儀器40-41
• 4.3 實驗方法41-42
• 4.3.1 納米金溶液的制備41
• 4.3.2 適配體、雙酚A、PDDA以及納米金之間的反應(yīng)41
• 4.3.3 吸光度的測量41
• 4.3.4 檢測體系的條件優(yōu)化41-42
• 4.3.5 檢測體系的靈敏度和特異性42
• 4.3.6 水樣的預(yù)處理42
• 4.4 結(jié)果與討論42-50
• 4.4.1 檢測原理42-43
• 4.4.2 核酸適配體與納米金的表征43-44
• 4.4.3 檢測體系條件的優(yōu)化44-47
• 4.4.4 傳感體系的檢測性能47-49
• 4.4.5 加標(biāo)回收實驗49-50
• 4.5 本章小結(jié)50-51
• 第五章 結(jié)論與展望51-53
• 5.1 研究成果51-52
• 5.2 論文創(chuàng)新點52
• 5.3 展望52-53
• 參考文獻(xiàn)53-61
• 致謝61-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和專利62

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王巍;賈凌云;;適配體篩選方法研究進(jìn)展[J];分析化學(xué);2009年03期

2 謝海燕;陳薛釵;鄧玉林;;核酸適配體及其在化學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用[J];化學(xué)進(jìn)展;2007年06期

3 屈鋒;劉允;任肖敏;趙新穎;張經(jīng)華;;毛細(xì)管電泳在核酸適配體研究及核酸適配體篩選中的應(yīng)用[J];化學(xué)進(jìn)展;2009年Z2期

4 趙強(qiáng);樂曉春;;核酸適配體親和色譜的研究進(jìn)展[J];色譜;2009年05期

5 朱靜;黃勇;蔣小平;譚鐘揚;蔣健暉;沈國勵;俞汝勤;;基于核酸適配體-質(zhì)粒DNA復(fù)合物信號放大的熒光免疫傳感技術(shù)[J];分析化學(xué);2009年11期

6 ;生物分析中的核酸適配體[J];分析化學(xué);2012年05期

7 李瑜;王源升;于斌;張靜秋;董瑞;;核酸適配體在光生化檢測中的應(yīng)用[J];廣州化工;2012年14期

8 王周平;張維瀟;;適配體及其研究進(jìn)展[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報;2013年09期

9 ;《核酸適配體手冊》[J];分析化學(xué);2013年12期

10 李曉佩;楊良嶸;黃昆;李文松;孫西同;劉會洲;;核酸適配體在生化分離及檢測領(lǐng)域中的研究進(jìn)展[J];化工學(xué)報;2013年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔡圣;劉彩云;盧建忠;;基于核酸適配體和酶循環(huán)放大的腺苷化學(xué)發(fā)光檢測[A];中國化學(xué)會第十屆全國發(fā)光分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2011年

2 陳巍;趙新穎;屈鋒;;毛細(xì)管電泳法篩選蛋白質(zhì)的核酸適配體的初步研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

3 楊曉娟;邴濤;梅宏成;上官棣華;;核酸適配體用于手性拆分L型和D型色氨酸[A];全國生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

4 鄭冬梅;婁新徽;;一種基于結(jié)構(gòu)開關(guān)型適配體的無標(biāo)記熒光傳感法[A];中國化學(xué)會第28屆學(xué)術(shù)年會第9分會場摘要集[C];2012年

5 薛利云;周小明;邢達(dá);;基于核酸適配體探針和酶輔助熒光信號擴(kuò)增的等溫高靈敏度蛋白檢測方法[A];中國光學(xué)學(xué)會2011年學(xué)術(shù)大會摘要集[C];2011年

6 馬文韜;古力;屈鋒;;毛細(xì)管電泳篩選大腸桿菌適配體的初步研究[A];全國生物醫(yī)藥色譜學(xué)術(shù)交流會（2010景德鎮(zhèn)）論文集[C];2010年

7 梁好均;徐華國;鄧偉;;核酸適配體鏈構(gòu)象轉(zhuǎn)變的研究[A];2014年兩岸三地高分子液晶態(tài)與超分子有序結(jié)構(gòu)學(xué)術(shù)研討會摘要集[C];2014年

8 王曉芳;程琳;耿霞;趙強(qiáng);;基于適配體修飾的磁珠和量子點熒光法檢測凝血酶[A];中國化學(xué)會第28屆學(xué)術(shù)年會第9分會場摘要集[C];2012年

9 汪海林;章大鵬;;單核苷水平核酸適配體與蛋白質(zhì)相互作用分析[A];中國化學(xué)會第28屆學(xué)術(shù)年會第9分會場摘要集[C];2012年

10 溫桂清;范燕燕;梁愛惠;蔣治良;;核酸適配體納米金共振散射光譜檢測血清中鉀離子[A];中國化學(xué)會第十五屆全國有機(jī)分析及生物分析學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 潘文;核酸適配體在醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊[N];中國醫(yī)藥報;2010年

2 于洋　田野;蛋白質(zhì)檢測有了新方法[N];吉林日報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃玉坤;基于核酸適配體識別-時間分辨熒光納米探針的生物毒素檢測方法研究[D];江南大學(xué);2015年

2 陳霞;功能核酸的篩選及在分析檢測中的應(yīng)用[D];武漢大學(xué);2012年

3 林雪霞;微流控芯片與可控適配體技術(shù)用于細(xì)胞代謝物分析及其相互作用的研究[D];北京化工大學(xué);2015年

4 周慶同;生物相空間中的適配體和藥物虛擬篩選[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2015年

5 郭業(yè)民;基于適配體傳感器的牛奶中抗生素殘留快速檢測技術(shù)研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

6 李菁菁;適配體功能化的熒光納米探針用于蛋白和細(xì)胞傳感研究[D];南京大學(xué);2012年

7 于鴿;乙丙肝病毒相互干擾及適配體在肝癌診斷及靶向治療中的作用[D];吉林大學(xué);2016年

8 王成全;基于磁控適配體傳感體系的農(nóng)產(chǎn)品中典型霉菌毒素檢測研究[D];江蘇大學(xué);2016年

9 姜紅巖;自組裝RNA適配體納米傳感器[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

10 胡波;海洋聚醚類毒素基于適配體的檢測及生物合成的探索[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張月俠;蛋白質(zhì)寡核苷酸適配體的篩選與應(yīng)用研究[D];山東師范大學(xué);2009年

2 李慧玲;BHL DNA適配體對銅綠假單胞菌群體感應(yīng)系統(tǒng)抑制作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉金釧;適配體納米金比色法靈敏度影響因素研究及其在食品安全檢測中的應(yīng)用[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

4 于連元;核酸適配體修飾的納米顆粒在腫瘤靶向免疫治療及靶向熱療中的應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

5 趙變軍;基于適配體特異性作用的乳腺癌細(xì)胞表面多種腫瘤標(biāo)記物同時檢測的新方法研究[D];南京師范大學(xué);2015年

6 喬醴峰;基于核酸適配體的β-葡萄糖醛酸苷酶一步純化固定化研究及其應(yīng)用[D];石河子大學(xué);2015年

7 呂莉;基于適配體的酶聯(lián)吸光度法檢測血小板衍生生長因子-BB[D];山西大學(xué);2015年

8 陳艷霞;核酸適配體/小檗堿熒光體系的構(gòu)筑及分析應(yīng)用[D];山西大學(xué);2015年

9 呂琴;基于熒光標(biāo)記適配體的熒光各向異性法檢測小分子[D];山西大學(xué);2015年

10 朱志玲;基于核酸適配體的赭曲霉毒素A SPR檢測技術(shù)研究[D];北京化工大學(xué);2015年

，

本文編號：1093344