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雌二醇和睪丸酮及其拮抗劑氟他胺對(duì)卜氏晶囊輪蟲(chóng)種群的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2019-11-16 12:44
【摘要】:環(huán)境激素又稱(chēng)內(nèi)分泌干擾物,其代謝產(chǎn)物或中間衍生物最終都會(huì)通過(guò)不同途徑進(jìn)入水域生態(tài)系統(tǒng)。近年來(lái),利用水生生物檢測(cè)環(huán)境激素的生物學(xué)效應(yīng)已成為水生態(tài)環(huán)境研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題。輪蟲(chóng)在水生態(tài)系統(tǒng)中扮演著重要角色,而且具有個(gè)體小,生殖速度快,生活史較短和材料易獲取以及對(duì)毒物敏感等特點(diǎn),因此在生態(tài)毒理學(xué)中作為受試動(dòng)物得到廣泛認(rèn)可。本論文以卜氏晶囊輪蟲(chóng)作為受試動(dòng)物,研究其在雌二醇、睪丸酮及其拮抗劑氟他胺的脅迫下實(shí)驗(yàn)種群的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,揭示晶囊輪蟲(chóng)在雌激素(雌二醇)、雄激素(睪丸酮)及雄性激素拮抗劑(氟他胺)單獨(dú)作用和聯(lián)合作用下種群參數(shù)的差異,為環(huán)境激素風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供新的思路。主要研究結(jié)果如下:1.雌二醇、睪丸酮和氟他胺單一因素脅迫對(duì)卜氏晶囊輪蟲(chóng)種群的影響卜氏晶囊輪蟲(chóng)分別經(jīng)過(guò)三種物質(zhì)不同濃度(0,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0mg/L)處理,置于恒溫培養(yǎng)箱中(約25。C),光照40001x,L:D=16:8,每間隔12h在顯微鏡下觀(guān)察一次,挑出幼體和死亡的母體并記錄數(shù)據(jù),每24h更換一次新鮮培養(yǎng)液,實(shí)驗(yàn)一直持續(xù)到母體全部死亡。在睪丸酮作用下,隨著濃度升高(2.0-8.0 mg/L),輪蟲(chóng)存活曲線(xiàn)由A型(前期死亡率很低,末期死亡率升高)轉(zhuǎn)變?yōu)锽型(各個(gè)年齡段的死亡率是基本相等的)和C型(此類(lèi)型前期死亡率很高,以后各年齡階段死亡率降低)曲線(xiàn),類(lèi)似的變化規(guī)律也表現(xiàn)在雌二醇處理組。當(dāng)雌二醇濃度為1.0,2.0,4.0和8.0mg/L時(shí),輪蟲(chóng)的生殖率均低于對(duì)照組,尤其在雌二醇濃度為4.0和8.0mg/L時(shí),輪蟲(chóng)的生殖率受到顯著抑制(P0.05)。氟他胺處理組,隨著氟他胺濃度從0.5mg/L增加到8.0mg/L時(shí),其存活曲線(xiàn)逐漸由A型經(jīng)過(guò)B型過(guò)渡到C型曲線(xiàn)。在各處理組,卜氏晶囊輪蟲(chóng)生殖率隨著氟他胺濃度的上升而下降,在高濃度氟他胺作用下受到的毒性作用較強(qiáng)。當(dāng)氟他胺濃度為4.0和8.0 mg/L時(shí),輪蟲(chóng)的生殖率受到顯著抑制(P0.05),輪蟲(chóng)在8.0mg/L氟他胺濃度下生殖終止,不產(chǎn)生任何后代。對(duì)照組的存活曲線(xiàn)表現(xiàn)為A型曲線(xiàn)。卜氏晶囊輪蟲(chóng)在三種激素單獨(dú)作用下的各生命表參數(shù)顯示:凈生殖率(R0)隨著三種激素濃度上升而下降。但不同的是,下降的速率不同。輪蟲(chóng)在雌二醇作用下的R0值的下降速率要比其他兩種激素下降的更快。在0.5mg/L氟他胺處理組,R0具有最大值,為13.8,但與對(duì)照組(12.3)相比差異不顯著(P0.05)。R0的最小值同樣也出現(xiàn)在氟他胺處理組中,當(dāng)氟他胺濃度為8.0mg/L時(shí),R0值為0,且在此濃度下輪蟲(chóng)沒(méi)有產(chǎn)出子代。時(shí)代時(shí)間(T)和內(nèi)稟增長(zhǎng)率(rm)都比對(duì)照組低,且其都隨著三種激素濃度的上升而下降。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明R0,T和rm都顯著受三種激素濃度的影響(P0.05)。2.激素聯(lián)合作用對(duì)卜氏晶囊輪蟲(chóng)種群的影響(1)氟他胺、雌二醇同睪丸酮激素組合效應(yīng)卜氏晶囊輪蟲(chóng)在不同濃度氟他胺和睪丸酮聯(lián)合作用下,即,氟他胺(F;0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/L)分別于不同濃度睪丸酮(L 0,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0mg/L)相互聯(lián)合。結(jié)果表明,R0,T和rm隨著氟他胺濃度上而下降,當(dāng)氟他胺濃度為0.5,1.0,2.0和4.0mg/L與0.5mg/L睪丸酮聯(lián)合時(shí),其R0值均高于氟他胺單獨(dú)作用時(shí)的R0值(P0.05)。同樣在雌二醇和睪丸酮聯(lián)合實(shí)驗(yàn),即雌二醇(E;0,0.5,1.0,2.0,4.0,80 mg/L)分別于不同濃度睪丸酮(T;0,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0mg/L)相互聯(lián)合,發(fā)現(xiàn)R.和T均隨著雌二醇的濃度上升而顯著下降(P0.05)。在不同濃度組合中,發(fā)現(xiàn)E0.5T0.5(13.3)(P0.05),E1T0.5(7.4),E2T0.5(3.8)和E4T0.5(3.33)(P0.05)的R0值要高于相對(duì)應(yīng)的雌二醇單獨(dú)處理組(分別為:11.3,6.9,3.2,1.9),而E8To.5組Ro值低于E8 T0組,但差異不顯著(P0.05)。(2)氟他胺、雌二醇和睪丸酮聯(lián)合總濃度為8mg/L時(shí)組合效應(yīng)氟他胺和雌二醇分別和睪丸酮組合,設(shè)定總濃度為8 mg/L,研究卜氏晶囊輪蟲(chóng)種群參數(shù)發(fā)現(xiàn),在所有處理組中,含有低濃度的雌二醇時(shí),生命表參數(shù)R0,T和rm值均顯著高于含有高濃度雌二醇時(shí)(P0.05)。類(lèi)似的結(jié)果也表現(xiàn)在氟他胺和睪丸酮組合中,即,在低濃度氟他胺處理組中各參數(shù)值顯著高于高濃度氟他胺處理組(P0.05)。除對(duì)照組外,在各處理組中,R0最大值分別出現(xiàn)在E1T7(4.8)和F1T7(6.8),T的最大值也出現(xiàn)在E1T7和FiT7處理組中(分別為37.24h和51.29h)。在本研究中,嘗試?yán)貌妒承暂喯x(chóng)評(píng)價(jià)雌二醇、睪丸酮以及其拮抗劑氟他胺單因素脅迫和聯(lián)合作用對(duì)輪蟲(chóng)種群動(dòng)態(tài)的影響,單因素脅迫實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)R0,T和rm都顯著受三種激素濃度的影響(P0.05)。卜氏晶囊輪蟲(chóng)對(duì)三種物質(zhì)的敏感性相比而言,其對(duì)氟他胺和雌二醇更為敏感。在聯(lián)合實(shí)驗(yàn)中采用了兩種不同的激素聯(lián)合方式去混合激素。從激素聯(lián)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,R0和T對(duì)于氟他胺和雌二醇更敏感。同睪丸酮相比,卜氏晶囊輪蟲(chóng)對(duì)氟他胺和雌二醇更為敏感,這點(diǎn)同單因素脅迫實(shí)驗(yàn)結(jié)果保持一致。在一些氟他胺和睪丸酮激素聯(lián)合實(shí)驗(yàn)組中的結(jié)果表明睪丸酮能夠消除一定氟他胺對(duì)輪蟲(chóng)的毒理作用,而在雌二醇和睪丸酮的聯(lián)合實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)在部分濃度聯(lián)合組中雌二醇和睪丸酮呈現(xiàn)協(xié)同作用。
【圖文】:

模式圖,輪蟲(chóng),生活史,模式圖


在母體內(nèi)產(chǎn)卵,,賠化后幼體直接產(chǎn)于體外。可直接透過(guò)晶囊逡逑輪蟲(chóng)身體觀(guān)察到母體所攜帶的胚胎種類(lèi)及數(shù)量IW。晶囊輪邐?逡逑蟲(chóng)生活史同單巢綱輪蟲(chóng)一樣存在世代交替現(xiàn)象口W邋(如下圖1.1)。h氏晶囊輪蟲(chóng)逡逑一般生活在溫帶、堿性而富含營(yíng)養(yǎng)的湖泊或池塘中,在鹽度大于8的半咸水池塘逡逑中不能生存,屬于較狹鹽性的淡水動(dòng)物0W,是產(chǎn)大型卵(大于7mm)的淡水魚(yú)逡逑苗的優(yōu)質(zhì)開(kāi)口巧料。MitchelllW、G冊(cè)ertl"l、SaltW等曾就h氏晶囊輪蟲(chóng)生物學(xué)逡逑和分類(lèi)學(xué)方面做過(guò)一些報(bào)道。盡管利用h氏晶囊輪蟲(chóng)所獨(dú)具的形態(tài)表型特征(多逡逑態(tài)性)和生活史的特異性(具有雙性雌體現(xiàn)象)進(jìn)行毒理學(xué)研巧己開(kāi)始引起人們逡逑的關(guān)注1?1,但目前大多數(shù)研究仍局限在有關(guān)h氏晶囊輪蟲(chóng)形態(tài)結(jié)構(gòu)、食性特點(diǎn)、逡逑6逡逑

存活曲線(xiàn),輪蟲(chóng),晶囊輪蟲(chóng),存活曲線(xiàn)


0邋12邋24邋巧姑姑邋72邋84邋96邋1081201321441邋說(shuō)邋16818日巧2邋204邋216邋228邋240逡逑Age(h)逡逑圖2.1邋h氏晶囊輪蟲(chóng)在l#他胺作用下的存活曲線(xiàn)逡逑Figure邋2.1邋Age-speci巧C邋survivorship邋curves邋of邋巧姑打c/m幻邋6r/gAnve//y邋in邋relation邋化邋differe
【學(xué)位授予單位】:南京師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:X171.5

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5 陶志華;許剛;陳兵華;毛易捷;何晶晶;吳偉;林曉梅;陳占國(guó);沈默;周武;;氟他胺聯(lián)合去雄激素環(huán)境誘導(dǎo)雄激素非依賴(lài)性前列腺癌細(xì)胞模型的建立[A];全國(guó)臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國(guó)臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

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