【摘要】：填埋場(chǎng)垃圾堆體的細(xì)菌群落在垃圾降解中發(fā)揮著重要作用.選擇北京市北神樹(shù)生活垃圾填埋場(chǎng),通過(guò)鉆井的方法對(duì)填埋深度6~36.1m,填埋時(shí)間2~15年的垃圾進(jìn)行了分層采樣,采用變性梯度凝膠電泳、測(cè)序、熒光定量PCR對(duì)垃圾的細(xì)菌群落進(jìn)行了檢測(cè),同時(shí)測(cè)量了相關(guān)的環(huán)境因子.分析了垃圾堆體細(xì)菌群落結(jié)構(gòu),細(xì)菌數(shù)量和多樣性沿深度分布特征及其環(huán)境因子的關(guān)系.結(jié)果表明,堆體內(nèi)菌群主要來(lái)自厚壁菌門(mén)(47.6%)和變形菌門(mén)(35.3%),優(yōu)勢(shì)屬為Natronoanaerobium(20.1%)、志賀氏菌屬(20.0%)、梭菌屬(14.0%);細(xì)菌多樣性沿填埋深度增大,細(xì)菌數(shù)量則降低;細(xì)菌多樣性與淀粉、pH值、纖維素、含水率呈現(xiàn)正相關(guān),與總磷、總有機(jī)碳、半纖維素、蛋白質(zhì)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān).垃圾降解水解酸化階段在2年內(nèi)基本完成,填埋9年以上的垃圾已基本趨于穩(wěn)定.
【圖文】：

圖1垃圾填埋堆體及采樣點(diǎn)信息Fig．1Schematicofthelandfillandthedistributionofsamplingpoints1.2理化性質(zhì)與化學(xué)成分分析含水率測(cè)定:稱(chēng)取10g樣品于105～110℃烘干至恒重(約8h)，，取出放入干燥器冷卻20min，立即稱(chēng)重．pH測(cè)定:稱(chēng)取50g風(fēng)干垃圾樣品，用攆缽碾碎并過(guò)1mm篩，取篩下物5g置于燒杯，加入25ml無(wú)CO2水，攪拌30min，靜置30min，離心后用PHSJ3F型酸度計(jì)測(cè)定上清液pH值．垃圾中代表性的化學(xué)成分是基于干重測(cè)定的［20］．總有機(jī)質(zhì)測(cè)定參照中華人民共和國(guó)城鎮(zhèn)建設(shè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)CJ/T96—1999，灼燒法;總有機(jī)碳利用測(cè)定的總有機(jī)質(zhì)含量換算，換算方程為總有機(jī)碳=(總有機(jī)質(zhì)+0.477)/1.911［21］;淀粉含量測(cè)定參照食品標(biāo)準(zhǔn)，GB/T5009.9—2008;纖維素、半纖維素含量測(cè)定參照GB/T23857—2009生活垃圾填埋場(chǎng)降解治理的監(jiān)測(cè)與檢測(cè);蛋白質(zhì)測(cè)定采用紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量;脂肪測(cè)定參照GB5413.3—2010;溶解性底物以垃圾濾液中CODcr計(jì)，底物占垃圾百分含量為CODcr數(shù)值占垃圾的比例;總氮參照GB11894—89進(jìn)行測(cè)定;總磷的測(cè)定采用鉬酸銨分光光度法．1.3樣品預(yù)處理與DNA提取垃圾成分存在很大的異質(zhì)性，直接提取基因組DNA可能導(dǎo)致結(jié)果分析不準(zhǔn)確，因此本文參照Staley［22］預(yù)處理方法，并略作改進(jìn):用pH值6.73的冷磷酸緩沖液對(duì)50g垃圾充分浸提，再用0.45mm圓孔篩過(guò)濾，所得濾液分裝入50ml離心管，以3220g離心5min;棄去上清夜，將混勻沉淀物放入－20℃冷凍干燥．采用MOBIOPowerSoil湟DNAIsolationkit提取樣品的基因組DNA，用MOBIO純化試劑盒進(jìn)行純化，至DNA純度檢測(cè)為A260/280在1.8左右，A260/230在2.0左右．1.4PCＲ-DGGE與數(shù)據(jù)分析PCＲ擴(kuò)增(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)):以提取的基因組DNA為模板，選擇引物GC-341F(5'-CGCCCGCCGCGCCCCGCGCCCGGCCC

圖2不同填埋深度的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)Fig．2Bacterialcommunitystructureatdifferentlandfilldepths表1堆體內(nèi)部主要細(xì)菌類(lèi)群及分布統(tǒng)計(jì)結(jié)果Table1Distributionofthedominantbacteriainthelandfill門(mén)比例/%綱比例/%目比例/%科比例/%屬比例/%厚壁菌門(mén)(47．6)Firmicutes芽孢桿菌綱(8．4)Bacilli乳桿菌目(5．1)Lactobacillales肉桿菌科(5．1)Carnobacteriaceae毛球菌屬(5．1)Trichococcus芽孢桿菌目(3．3)Bacillales芽孢桿菌科(3．3)Bacillaceae芽孢桿菌屬(3．3)Bacillus梭菌綱(39．2)Clostridia梭菌目(15．1)Clostridiales梭菌科(14．0)Clostridiaceae梭菌屬(14．0)Clostridium消化鏈球菌科(1．1)Peptostreptococcaceae未培養(yǎng)(1．1)Uncultured鹽堿厭氧菌目(20．1)Natranaerobiales鹽堿厭氧菌科(20．1)NatranaerobiaceaeNatronoanaerobium(20．1)熱厭氧桿菌目(4．0)Thermoanaerobacterales熱厭氧桿菌科(4．0)ThermoanaerobacteraceaeSyntrophaceticus(1．4)Thermacetogenium(2．6)變形菌門(mén)(35．3)Proteobacteriaα-變形菌綱(0．9)Alphaproteobacteria未培養(yǎng)(0．9)Uncultured未培養(yǎng)(0．9)Uncultured未培養(yǎng)(0．9)Unculturedβ-變形菌綱(0．6)Betaproteobacteria伯克氏菌目(0．6)Burkholderiales叢毛單胞菌科(0．6)Comamonadaceae叢毛單胞菌屬(0．6)Comamonasγ-變形菌綱(33．8)Gammaproteobacteria假單孢菌目(8．9)Pseudomonadales假單胞菌科(5．1)Pseudomonadaceae假單胞菌屬(5．1)Pseudomonas莫拉氏菌科(3．8)Moraxellaceae嗜冷桿菌屬(3．8)Psychrobacter甲基球菌目(1．9)Methylococcales甲基球菌科(1．9)Methylococcaceae甲
【作者單位】： 北京大學(xué)深圳研究生院環(huán)境與能源學(xué)院;北京大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院北京市新型污水深度處理工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAJ07B04)
【分類(lèi)號(hào)】：X172;X799.3

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本文編號(hào)：2533662