細(xì)胞芯片是指含有二維(2D)或三維(3D)培養(yǎng)細(xì)胞的芯片型微反應(yīng)器,主要包括帶有灌流裝置的微流控細(xì)胞芯片和非灌流細(xì)胞芯片(non-fluidic cell chip,例如靜態(tài)培養(yǎng)的微孔和微陣列細(xì)胞芯片)。在眾多材料中,水凝膠作為“軟而濕”的材料,與人體組織器官的物理特性最為接近,因此成為細(xì)胞芯片構(gòu)建材料的最佳選擇之一。然而,傳統(tǒng)的水凝膠在水溶液中會發(fā)生顯著甚至嚴(yán)重的溶脹,一方面大大削弱了其機械性能,另一方面使其構(gòu)建的細(xì)胞芯片變形或塌陷,從而限制了其應(yīng)用�；诖�,本文首先制備了不溶脹的F127-DA水凝膠,其是一種聚乙二醇和聚丙二醇的嵌段高分子交聯(lián)網(wǎng)絡(luò),具有良好的機械強度和細(xì)胞相容性。隨后,采用該不溶脹水凝膠構(gòu)建了肝-血管微流控芯片,模擬人體肝臟的結(jié)構(gòu)與功能。最后,針對復(fù)雜組分物質(zhì)健康性評價的應(yīng)用,我們將微流控芯片簡化為肝和血管的聚球體微孔芯片,并將其作為通量篩選平臺,應(yīng)用于多種中國白酒的健康性評價。本文的研究結(jié)果簡要敘述如下:首先,利用紫外光引發(fā)法制備得到F127-DA水凝膠,確證了其在37℃水溶液中不溶脹的特性,且該不溶脹性不受離子強度和pH的影響。由于其不溶脹性,在水溶液中平衡后的F...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 前言
    1.2 細(xì)胞芯片
        1.2.1 細(xì)胞芯片的構(gòu)型
        1.2.2 細(xì)胞芯片的構(gòu)建材料
        1.2.3 細(xì)胞芯片的應(yīng)用
    1.3 飲酒的危害與中國白酒的健康性評價
        1.3.1 飲酒對人體的危害性
        1.3.2 中國白酒的健康特性評價
    1.4 本課題研究思路
第二章 材料與方法
    2.1 儀器與試劑
        2.1.1 主要實驗儀器
        2.1.2 實驗試劑
    2.2 水凝膠的制備與表征
        2.2.1 水凝膠模具的制作
        2.2.2 F127-DA水凝膠的制備
        2.2.3 甲基丙烯�；髂z(GelMA)的制備
        2.2.4 F127-DA水凝膠的表征
    2.3 細(xì)胞芯片的構(gòu)建和功能表征
        2.3.1 細(xì)胞在微流控芯片上的培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞在微孔芯片上的培養(yǎng)
        2.3.3 細(xì)胞全蛋白定量分析
        2.3.4 細(xì)胞活率檢測
        2.3.5 肝細(xì)胞功能測定
        2.3.6 內(nèi)皮細(xì)胞功能測定
        2.3.7 血管細(xì)胞聚球體的冷凍切片
        2.3.8 血管細(xì)胞聚球體的H&E染色
        2.3.9 內(nèi)皮細(xì)胞的熒光染色
        2.3.10 肝細(xì)胞聚球體死/活細(xì)胞的熒光染色
    2.4 中國白酒的血管/肝毒性評價實驗
        2.4.1 中國白酒和伏特加酒的性質(zhì)測定
        2.4.2 酒樣作用實驗
        2.4.3 LDH釋放率測定
        2.4.4 細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基水平的檢測
    2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 基于F127-DA水凝膠的肝-血管微流控芯片構(gòu)建
    3.1 引言
    3.2 F127-DA水凝膠的表征
        3.2.1 溶脹行為表征
        3.2.2 機械性能評價
        3.2.3 傳質(zhì)能力評價
    3.3 肝-血管微流控芯片的仿生化構(gòu)建
        3.3.1. 設(shè)計思路
        3.3.2. 構(gòu)建過程
    3.4 微流控芯片中肝/血管細(xì)胞的形態(tài)觀察與功能評價
        3.4.1 血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)
        3.4.2 肝細(xì)胞聚球體的形態(tài)和細(xì)胞活率
        3.4.3 肝細(xì)胞聚球體的功能分析
    3.5 小結(jié)
第四章 基于F127-DA水凝膠的肝/血管聚球體微孔芯片構(gòu)建
    4.1 引言
    4.2 微孔芯片的構(gòu)建過程
    4.3 肝細(xì)胞聚球體微孔芯片的構(gòu)建與功能評價
        4.3.1 細(xì)胞共培養(yǎng)和膠原對肝細(xì)胞聚球體形態(tài)和功能的影響
        4.3.2 微孔尺寸對肝細(xì)胞聚球體形態(tài)和功能的影響
    4.4 血管細(xì)胞聚球體微孔芯片的構(gòu)建與功能評價
        4.4.1 微孔尺寸對血管細(xì)胞聚球體形態(tài)與功能的影響
        4.4.2 血管細(xì)胞聚球體的微觀結(jié)構(gòu)觀察
    4.5 小結(jié)
第五章 肝/血管聚球體微孔芯片用于中國白酒的健康特性評價
    5.1 引言
    5.2 酒樣性質(zhì)參數(shù)
    5.3 利用肝細(xì)胞聚球體微孔芯片評價不同酒樣的肝毒性
        5.3.1 酒樣對肝細(xì)胞聚球體形態(tài)和活率的影響
        5.3.2 酒樣對肝細(xì)胞聚球體ROS含量的影響
        5.3.3 酒樣對肝細(xì)胞聚球體白蛋白和尿素分泌量的影響
        5.3.4 中國白酒對肝細(xì)胞聚球體作用的機理分析
    5.4 利用血管細(xì)胞聚球體微孔芯片評價不同酒樣的血管毒性
        5.4.1 酒樣對血管細(xì)胞聚球體形態(tài)和活率的影響
        5.4.2 酒樣對血管細(xì)胞聚球體ROS和NO含量的影響
        5.4.3 酒樣對血管細(xì)胞聚球體PGI2和TFPI分泌的影響
        5.4.4 中國白酒對血管細(xì)胞聚球體作用的機理分析
    5.5 微孔芯片用于食品健康特性評價的優(yōu)勢分析
    5.6 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻
作者簡歷
攻讀碩士學(xué)位期間的學(xué)術(shù)成果



本文編號：4043538