我國(guó)一直是令世人矚目的體育大國(guó),特別是北京奧運(yùn)會(huì)的成功舉辦和2022年北京冬奧會(huì)的申辦成功,都在說明體育事業(yè)已在我國(guó)的地位得到了顯著的提升。因此,高水平運(yùn)動(dòng)員的運(yùn)動(dòng)基因成為了極其珍貴的遺傳資源。如果對(duì)優(yōu)秀的運(yùn)動(dòng)員不采取保護(hù)性的基因保存,任其退役后運(yùn)動(dòng)能力逐漸消退直至死亡,無疑是我國(guó)體育事業(yè)的巨大損失。本文以昆侖鴻星俱樂部的優(yōu)秀冰球運(yùn)動(dòng)員為研究對(duì)象,建立永生化細(xì)胞系,對(duì)優(yōu)秀冰球運(yùn)動(dòng)員的遺傳資源進(jìn)行保存,進(jìn)行生物學(xué)特性檢測(cè)來確定永生化細(xì)胞是否突變。并使用轉(zhuǎn)化后的永生化細(xì)胞進(jìn)行耐力相關(guān)基因表達(dá)的研究。本文通過EBV轉(zhuǎn)化B淋巴細(xì)胞的方式建立永生化細(xì)胞系,通過PCR、陽性率檢測(cè)、核型檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)和細(xì)胞周期檢測(cè)等多種實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)轉(zhuǎn)化后的永生化細(xì)胞是否具有B淋巴細(xì)胞的特性。再以永生化細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)樣本,對(duì)耐力相關(guān)基因的表達(dá)情況進(jìn)行研究。轉(zhuǎn)化后的永生化細(xì)胞傳代速度有明顯提升,在表面標(biāo)志物檢測(cè)和陽性率檢測(cè)中表達(dá)了B淋巴細(xì)胞的特異性標(biāo)志物CD19和CD20。染色體數(shù)量和形態(tài)未發(fā)生變異。細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡檢測(cè)的結(jié)果表明永生化細(xì)胞仍然具有充足的活力,能夠繼續(xù)進(jìn)行傳代操作。將轉(zhuǎn)化后的永生化細(xì)胞耐力基因表達(dá)情況...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1剛復(fù)蘇后的B95-8細(xì)胞（左圖為100×視野，右圖為200×視野）

圖1剛復(fù)蘇后的B95-8細(xì)胞（左圖為100×視野，右圖為200×視野）蘇的B95-8細(xì)胞需要移入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，并加入5mlRPMI-1640全培養(yǎng)基進(jìn)。通過觀察培養(yǎng)基的顏色或體積來確定補(bǔ)充培養(yǎng)基的時(shí)間，每次補(bǔ)充全培不吸出原液體，將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體補(bǔ)充到5ml。由于....

圖2培養(yǎng)48h的B95-8細(xì)胞（左圖為100×視野，右圖為200×視野）

19圖2培養(yǎng)48h的B95-8細(xì)胞（左圖為100×視野，右圖為200×視野）

圖3傳代前B95-8細(xì)胞（40×視野）

圖3傳代前B95-8細(xì)胞（40×視野）細(xì)胞輕輕吹散，使細(xì)胞與培養(yǎng)基混合均個(gè)培養(yǎng)瓶中添加新的全培養(yǎng)基。傳代后細(xì)胞類似，大部分為懸浮小細(xì)胞團(tuán)。

圖4傳代后B95-8細(xì)胞（40×視野）

圖4傳代后B95-8細(xì)胞（40×視野）胞密度達(dá)到80%以上，大量細(xì)胞聚集成養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)一天，給細(xì)胞

本文編號(hào)：4005961