本文選題：鼠諾如病毒MNV　切入點(diǎn)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR　出處：《中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志》2016年12期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的建立小鼠諾如病毒(murine norovirus,MNV)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法,為建立MNV規(guī)范化檢測(cè)方法提供依據(jù)。方法根據(jù)NCBI公布的60個(gè)MNV病毒株核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物,構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性質(zhì)控品,建立MNV實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法,并進(jìn)行特異性、靈敏度、重復(fù)性及穩(wěn)定性評(píng)價(jià)。用該方法對(duì)766只送檢小鼠的盲腸內(nèi)容物樣品進(jìn)行檢測(cè),初步了解北京地區(qū)實(shí)驗(yàn)小鼠MNV感染狀況。結(jié)果成功建立MNV實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法,該方法特異性好,與同種屬人類(lèi)諾如病毒(Hu No Vs)、貓杯狀病毒(FCV)均無(wú)交叉反應(yīng),檢測(cè)靈敏度可達(dá)101copies/μL。批內(nèi)及批間CT值變異系數(shù)均小于2%。應(yīng)用該方法在766份小鼠盲腸內(nèi)容物樣品中檢出301份MNV核酸陽(yáng)性樣品,陽(yáng)性率39.3%。結(jié)論建立的MNV實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法特異性好,靈敏度高,重復(fù)性好,可以用于MNV的快速定量檢測(cè)。
[Abstract]:Objective to establish a real-time fluorescent quantitative PCR method for the detection of murine norovirusus of mouse norovirus.Methods according to the nucleic acid sequences of 60 MNV virus strains published by NCBI, specific primers were designed and the standard positive quality control products were constructed. MNV real-time fluorescence quantitative PCR method was established to evaluate the specificity, sensitivity, reproducibility and stability of cecum contents in 766 mice. Results the real-time fluorescence quantitative PCR assay for the detection of MNV was successfully established. The method was specific and had no cross reaction with Hu No VsSN of the same species and calicivirus of cat. The sensitivity of detection was 101 copias / 渭 L. the coefficient of variation of CT values in and between batches was less than 2. 301 MNV nucleic acid positive samples were detected in 766 mouse caecum contents by this method. Conclusion the established MNV real-time fluorescent quantitative PCR method has good specificity, high sensitivity and good reproducibility, and can be used for rapid quantitative detection of MNV.
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源研究所;
【基金】：國(guó)家科技支撐課題(2013BAK11B01)
【分類(lèi)號(hào)】：R440

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 林健東;楊北兵;陳靜濃;;諾如病毒感染國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇;2010年08期

2 袁巧;王晨;李暉;鄧小玲;;貝類(lèi)中諾如病毒檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年05期

3 姚春霞;;全球冬季出現(xiàn)諾如病毒爆發(fā)高峰[J];上海農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2013年03期

4 楊華;;美國(guó)游輪暴諾如病毒100多人染病[J];大家健康;2013年06期

5 高志勇;嚴(yán)寒秋;羅明;劉桂榮;劉園;吳曉娜;賈蕾;王全意;黃芳;吳疆;莊輝;;北京地區(qū)諾如病毒分子生物學(xué)特點(diǎn)初步研究[J];中華流行病學(xué)雜志;2007年07期

6 吳疆;高志勇;劉桂榮;劉園;李潔;羅明;吳曉娜;賈蕾;竇相峰;嚴(yán)寒秋;;北京地區(qū)諾如病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查[J];中華流行病學(xué)雜志;2007年07期

7 鐘江;;諾如病毒研究進(jìn)展[J];微生物與感染;2007年03期

8 王家棟;章琪;方筠;田楨干;韓曉輝;沈士偉;陸曄;閻俊;嚴(yán)剛;周璇;盧鐘山;何宇平;李平;史方;王桂江;林建偉;朱美霞;;上海口岸首例郵輪大規(guī)模諾如病毒感染爆發(fā)的實(shí)驗(yàn)室快速診斷[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2008年06期

9 甘彥歡;溫玉琴;劉志挺;;諾如病毒影響及口岸預(yù)防[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2008年01期

10 曹曉鷗;張彥麗;陳振明;李暉;曾紅惠;曾鴻;;佛山市南海區(qū)散發(fā)急性腹瀉中諾如病毒毒株型別監(jiān)測(cè)分析[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2008年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鐘文龍;傅深省;王莉;陳湘雷;朱建忠;陳茂余;楊玉芳;;一起老年精神病區(qū)諾如病毒感染暴發(fā)的調(diào)查[A];2011廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2011年

2 張巧利;鐘新光;曾耀明;夏憲照;王曉霞;陳柏芬;;一起社區(qū)諾如病毒腹瀉爆發(fā)調(diào)查分析[A];第八屆粵港澳臺(tái)預(yù)防醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文匯編[C];2008年

3 曾玫;陳潔;龔四堂;徐曉華;朱朝敏;朱啟昒;;我國(guó)五所城市門(mén)診腹瀉兒童諾如病毒感染的臨床和分子流行病學(xué)監(jiān)測(cè)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2010年

4 薛亮;吳清平;;諾如病毒分子進(jìn)化研究進(jìn)展[A];2010第二屆中國(guó)食品安全高峰論壇論文集[C];2010年

5 鄒勇;;某中學(xué)1起諾如病毒腹瀉暴發(fā)疫情的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查分析[A];浙江省第十九屆農(nóng)村衛(wèi)生改革與發(fā)展學(xué)術(shù)會(huì)議大會(huì)論文集[C];2011年

6 丁華;;一起涉及7所學(xué)校的Ⅰ型諾如病毒感染性腹瀉暴發(fā)調(diào)查[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第一屆全國(guó)公共衛(wèi)生學(xué)術(shù)會(huì)議暨第四屆中國(guó)現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)培訓(xùn)項(xiàng)目匯編[C];2009年

7 呂虹;張國(guó)軍;康熙雄;;應(yīng)用恒溫?cái)U(kuò)增方法進(jìn)行諾如病毒檢測(cè)的研究[A];第五次全國(guó)免疫診斷暨疫苗學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2011年

8 夏體嬌;陳照立;諶志強(qiáng);邱志剛;王景峰;金敏;王新為;李君文;;2009年秋冬季節(jié)天津市病毒性腹瀉諾如病毒檢出情況分析[A];2011年全國(guó)環(huán)境衛(wèi)生學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

9 馬麗萍;姚琳;蘇來(lái)金;趙峰;周德慶;;牡蠣中諾如病毒幾種不同富集方法的比較[A];中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)第七屆年會(huì)論文摘要集[C];2010年

10 李丹;唐慶娟;李兆杰;王玉明;薛勇;薛長(zhǎng)湖;;三種分子生物學(xué)方法檢測(cè)牡蠣中諾如病毒的比較研究[A];2008年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 保健時(shí)報(bào)記者 穆晶晶;感染諾如病毒別驚慌[N];保健時(shí)報(bào);2007年

2 本報(bào)記者 劉遠(yuǎn)芬;諾如病毒仍有爆發(fā)風(fēng)險(xiǎn)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

3 中國(guó)疾控中心病毒所腹瀉病研究室主任 段招軍;諾如病毒感染 并非防不勝防[N];健康報(bào);2010年

4 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院急診科主任 李俊紅 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所研究員 張見(jiàn)麟;勤洗手 遠(yuǎn)離諾如病毒[N];健康報(bào);2012年

5 本報(bào)記者 金振婭;面對(duì)諾如病毒不必恐慌[N];光明日?qǐng)?bào);2012年

6 錢(qián)峰;嚴(yán)防諾如病毒疫情傳入和擴(kuò)散[N];健康報(bào);2007年

7 鄭靈巧　白瑩;北京 諾如病毒發(fā)病危險(xiǎn)上升[N];健康報(bào);2007年

8 周欣;諾如病毒感染是可以預(yù)防的[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

9 張愛(ài)強(qiáng)　記者　 夏丹;阻擊諾如病毒入侵[N];煙臺(tái)日?qǐng)?bào);2007年

10 本報(bào)記者 王朝;生吃貝類(lèi)當(dāng)心諾如病毒[N];保健時(shí)報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 賽林濤;濟(jì)南成人諾如病毒感染及兒童輪狀與諾如病毒感染特征比較的研究[D];山東大學(xué);2014年

2 司紅麗;諾如病毒核酸熒光定量檢測(cè)及其衣殼蛋白基因重組腺病毒免疫效果的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2006年

3 孫秀靜;1.分泌型和非分泌型母親母乳中諾如病毒抗體水平的研究 2.238例極低出生體重早產(chǎn)兒的生長(zhǎng)速率和影響因素[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 田毅;GⅡ-4型諾如病毒P粒子制備及HBGAs相關(guān)性研究[D];華北理工大學(xué);2015年

2 楊桂華;用番茄（Solanum lycopersicum）表達(dá)口服Norovirus亞單位疫苗[D];上海交通大學(xué);2013年

3 錢(qián)明明;諾如病毒RT-PCR方法的建立及其江蘇部分地區(qū)的流行病學(xué)研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

4 喬英琴;2014年重慶地區(qū)兒童諾如病毒腹瀉分子流行病學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 孔翔羽;2011-2014年我國(guó)部分地區(qū)諾如病毒的分子流行病學(xué)研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2015年

6 周永康;中國(guó)札如病毒的流行特征及諾如病毒GⅡ.17不同毒株P(guān)蛋白的唾液結(jié)合分析[D];蘭州大學(xué);2016年

7 孫晝;杭州地區(qū)腹瀉嬰幼兒諾如病毒感染狀況及危險(xiǎn)因素研究[D];浙江大學(xué);2010年

8 周曉紅;食品與水中諾如病毒檢測(cè)方法的建立及其在疫情暴發(fā)中的初步應(yīng)用[D];暨南大學(xué);2010年

9 桑少偉;諾如病毒急性胃腸炎分子流行病學(xué)調(diào)查研究[D];山東大學(xué);2012年

10 吳微;2010-2011年深圳市諾如病毒的分子流行病學(xué)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：1579235